纳米抗体、含其的融合蛋白及其在纯化多种血清型AAV中的用途制造技术

本申请公开了一种纳米抗体、含其的融合蛋白及其在纯化多种血清型AAV中的用途。该纳米抗体包括含有三个互补决定区CDR1、CDR2和CDR3的重链可变区；其中，CDR1包含序列如SEQ ID NO:1所示的氨基酸片段，CDR2包含序列如SEQ ID NO:2所示的氨基酸片段，CDR3包含序列如SEQ ID NO:3所示的氨基酸片段。该纳米抗体能够靶向多种血清型AAV，其可用于AAV的检测和纯化；能够通过单步纯化步骤代替多步纯化，在降低时间成本的同时提高AAV的产率。

【技术实现步骤摘要】

本申请涉及生物，具体涉及纳米抗体、含其的融合蛋白及其在纯化多种血清型aav中的用途。

技术介绍

1、腺相关病毒（adeno-associated virus，aav）属于细小病毒科依赖细小病毒属，它的生命周期取决于辅助病毒（例如 adv）的存在。aav由一个直径26 nm的二十面体蛋白衣壳和一个4.7 kb的单链dna基因组组成。衣壳由vp1、vp2和vp3三种类型亚基组成，比例为vp1:vp2:vp3=1:1:10。基因组的两端含有两个t形的反向重复序列（itr），其主要负责病毒复制开始和包装信号。rep编码病毒复制需要的四种蛋白质：rep78、rep68、rep52和rep40，cap编码三种蛋白亚基。aav基因组可以整合至人类基因组中的aavs1位点，此时的aav处于潜伏期。重组aav作为治疗性基因的病毒载体系统，在多项人体临床试验中均取得了成功。

2、目前，aav的纯化主要有cscl密度梯度离心法或碘克沙醇密度梯度离心、离子交换色谱、亲和层析和尺寸排阻色谱等。密度梯度离心法只适用于实验室小规模的生产，对大规模的应用不现实。其中，离子交换本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.靶向不同血清型腺相关病毒的纳米抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述纳米抗体或其抗原结合片段包括含有三个互补决定区CDR1、CDR2和CDR3的重链可变区；其中，所述CDR1包括序列如SEQ ID NO: 1所示的氨基酸片段，所述CDR2包括序列如SEQ ID NO: 2所示的氨基酸片段，所述CDR3包括序列如SEQ ID NO: 3所示的氨基酸片段。

2.如权利要求1所述的纳米抗体或其抗原结合片段，其特征在于，其包括序列如SEQ IDNO: 4所示的氨基酸片段；

3.融合蛋白，其特征在于，其包括如权利要1或2所述的纳米抗体或其抗原结合片段；

4....

【技术特征摘要】

1.靶向不同血清型腺相关病毒的纳米抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述纳米抗体或其抗原结合片段包括含有三个互补决定区cdr1、cdr2和cdr3的重链可变区；其中，所述cdr1包括序列如seq id no: 1所示的氨基酸片段，所述cdr2包括序列如seq id no: 2所示的氨基酸片段，所述cdr3包括序列如seq id no: 3所示的氨基酸片段。

2.如权利要求1所述的纳米抗体或其抗原结合片段，其特征在于，其包括序列如seq idno: 4所示的氨基酸片段；

3.融合蛋白，其特征在于，其包括如权利要1或2所述的纳米抗体或其抗原结合片段；

4.核酸，其特征在于，其包括编码如权利要求1或2所述的纳米抗体或其抗原结合片段或如权利要求3所述的融合蛋白的核苷酸序列。

5.重组表达载体，其特征在于，其包括如...

【专利技术属性】
技术研发人员：夏海锋，许瑞琪，王亚婵，
申请(专利权)人：东富龙千纯生物科技上海有限公司，
类型：发明
国别省市：