【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于基因检测领域,具体涉及一种核酸等温扩增检测体系及其检测方法。
技术介绍
1、核酸检测已广泛地应用于传染病或遗传病诊断、流行病学调查、肿瘤突变基因检测等领域,与免疫学检测技术相比,分子诊断灵敏度更高,结果更准确、可靠。核酸检测的最关键步骤为核酸扩增技术,聚合酶链式反应(pcr)是一种经典成熟的体外核酸扩增方法。然而,大型精密仪器及复杂的操作步骤,使得其应用场景依然受限。近些年来恒温体外核酸扩增技术悄然兴起,如lamp(环介导等温扩增技术)、tma(转录介导的扩增方法)、rpa(重组酶聚合酶扩增)、sda(链置换扩增技术)、hda(解旋酶依赖型扩增技术)、nasba(依赖核酸序列的扩增技术)、rca(滚环复制核酸扩增技术)、near(切口酶扩增反应技术)等。
2、其中的near(切口酶扩增反应技术)具有就是在dna切面上形成小切口,然后让聚合酶找到那个地方开始复制,不断的形成切口,不断的复制。这是非常巧妙的方法,不需要做pcr反应和热循环,让核酸扩增过程变得非常简单,而且速度更快。
3、随着单链缺口限制
...【技术保护点】
1.一种核酸等温扩增检测体系,其特征在于,包括引物、探针、切口内切酶和核糖核酸内切酶;所述引物中含有切口内切酶的切割识别序列;所述探针中含有至少一个核糖核苷酸碱基,所述核糖核苷酸碱基能与靶标序列互补。
2.如权利要求1所述的核酸等温扩增检测体系,其特征在于,还包括DNA聚合酶或逆转录酶;当靶标序列为DNA序列时,包括DNA聚合酶,当靶标序列为RNA序列时,除了DNA聚合酶还包括逆转录酶。
3.如权利要求2所述的核酸等温扩增检测体系,其特征在于,所述切口内切酶包括Nt.
4.如权利要求3所述的核酸等温扩增检测体系,其特征在于,所述核糖
...【技术特征摘要】
1.一种核酸等温扩增检测体系,其特征在于,包括引物、探针、切口内切酶和核糖核酸内切酶;所述引物中含有切口内切酶的切割识别序列;所述探针中含有至少一个核糖核苷酸碱基,所述核糖核苷酸碱基能与靶标序列互补。
2.如权利要求1所述的核酸等温扩增检测体系,其特征在于,还包括dna聚合酶或逆转录酶;当靶标序列为dna序列时,包括dna聚合酶,当靶标序列为rna序列时,除了dna聚合酶还包括逆转录酶。
3.如权利要求2所述的核酸等温扩增检测体系,其特征在于,所述切口内切酶包括nt.
4.如权利要求3所述的核酸等温扩增检测体系,其特征在于,所述核糖核酸内切酶为rnaseh2。
5.如权利要求4所述的核酸等温扩增检测体系,其特征在于,所述引物从5’端至3’端依次包含稳定区域序列、切口酶识别序列、靶核酸识别区域;所述探针为taqman探针、mgb探针、分子信标探针中的任意一种;探针上的标记物为荧光素、生物素、地高辛、同位素中的任意一种。
<...【专利技术属性】
技术研发人员:陈文柱,王剑峰,于继彬,
申请(专利权)人:苏州先达基因科技有限公司,
类型:发明
国别省市:
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