一种抗坏血酸保护的胶体金快速定量偶联核酸分子的制备方法技术

本发明专利技术涉及生物纳米材料合成技术领域，提供一种抗坏血酸保护的胶体金快速定量偶联核酸分子的制备方法，采用抗坏血酸修饰的金纳米颗粒AA‑AuNPs作为核心载体，有效克服金纳米颗粒AuNPs与核酸分子之间的强静电斥力，提高核酸负载效率与偶联层致密性。在巯基化末端的核酸分子体系中，AA<supgt;‑</supgt;阴离子介导的静电屏蔽效应与Au‑S共价键协同作用，使巯基化末端核酸分子与AA‑AuNPs即时自组装，仅混合即得，并在30秒内完成稳定偶联。在腺嘌呤末端的核酸分子体系中，采用浓缩策略，利用单一腺嘌呤碱基A<subgt;1</subgt;对AA‑AuNPs的偶联，突破传统方法对多聚腺嘌呤序列的依赖，实现核酸分子的普适性偶联，并提升SNA的密度与稳定性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物纳米材料合成，具体地说，涉及一种抗坏血酸保护的胶体金快速定量偶联核酸分子的制备方法。

技术介绍

1、球形核酸(sphericalnucleicacid,sna)是一种由核酸与纳米颗粒通过组装形成的核壳型纳米复合物，其典型结构为金纳米核与表面致密修饰的dna壳层构成的刚性杂化体系。sna不仅兼具纳米颗粒的等离子体效应和核酸的分子识别功能，更通过两者协同作用产生独特的物理化学特性(如增强的细胞穿透性、抗酶解稳定性等)，使其在生物传感、诊疗一体化、高通量分子诊断、活体成像及动态纳米组装等领域展现出显著优势。然而，现有sna制备技术受限于核酸负载效率低、表面修饰不均一及工艺复杂性等问题，难以满足规模化生产和多场景应用需求，开发兼具高效偶联、结构可控且操作简化的普适性合成方法成为推动其实际应用的关键挑战。

2、球形核酸(sna)的构建中，dna与金纳米颗粒(aunps)的结合方式分为巯基化修饰和非巯基化吸附两大体系，分别依赖au-s共价键和腺嘌呤等弱相互作用。自1996年基于au-s键的盐老化法被提出以来，巯基化dna修饰金纳米颗粒(a本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种抗坏血酸保护的胶体金快速定量偶联核酸分子的制备方法，其特征在于：直接将抗坏血酸阴离子AA-作为配体保护的金纳米颗粒AA-AuNPs胶体溶液与核酸分子溶液按照一定比例混合即实现快速、定量、高密度偶联；其中，核酸分子包括腺嘌呤末端的核酸分子和巯基化末端的核酸分子；巯基化末端的核酸分子通过AA介导的静电屏蔽效应与Au-S键协同作用实现即时自组装；腺嘌呤末端的核酸分子通过单腺票呤碱基A与AA-AuP进行偶联。

2.根据权利要求1所述的一种抗坏血酸保护的胶体金快速定量偶联核酸分子的制备方法，其特征在于：腺嘌呤末端的核酸分子成功偶联AA-AuNPs必需腺嘌呤碱基的数量低至1个、密...

【技术特征摘要】

1.一种抗坏血酸保护的胶体金快速定量偶联核酸分子的制备方法，其特征在于：直接将抗坏血酸阴离子aa-作为配体保护的金纳米颗粒aa-aunps胶体溶液与核酸分子溶液按照一定比例混合即实现快速、定量、高密度偶联；其中，核酸分子包括腺嘌呤末端的核酸分子和巯基化末端的核酸分子；巯基化末端的核酸分子通过aa介导的静电屏蔽效应与au-s键协同作用实现即时自组装；腺嘌呤末端的核酸分子通过单腺票呤碱基a与aa-aup进行偶联。

2.根据权利要求1所述的一种抗坏血酸保护的胶体金快速定量偶联核酸分子的制备方法，其特征在于：腺嘌呤末端的核酸分子成功偶联aa-aunps必需腺嘌呤碱基的数量低至1个、密度达0.10个/nm2、所需时间低于60秒；巯基化末端的核酸分子成功偶联aa-aunps的时间低于30秒、密度达0.18个/nm2，并在高盐浓度环境下仍保持稳定。

3.根据权利要求1所述的一种抗坏血酸保护的胶体金快速定量偶联核酸分子的制备方法，其特征在于：aa-aunps为直径5-60纳米的金纳米颗粒，其表面配体为抗坏血酸阴离子aa-；aa-aunps利用抗坏血酸作为还原剂直接水热合成；或利用其他配体保护的金纳米颗粒通过抗坏血酸配体交换反应制备；所述其他配体包括柠檬酸、ctab、pvp。

4.根据权利要求1所述的一种抗坏血酸保护的胶体金快速定量偶联核酸分子的制备方法，其特征在于：腺嘌呤末端的核酸分子的5'端或者3'端仅包含1个腺嘌呤；链长为11-60nt；巯基化末端的核酸分子的5'端修饰有c6-sh基团，链长为21-60nt。

5.根据权利要求1所述的一种抗坏血酸保护的胶体金快速定量偶联核酸分子的制备方法，其特征在于：腺嘌呤末端的核酸分子偶联方法是将150:1-500:1摩尔比的腺...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘洪林，李光平，汪成，吴馨月，
申请(专利权)人：合肥工业大学，
类型：发明
国别省市：