一种高细胞毒性抗肿瘤MAIT细胞的培养方法及其应用技术

技术编号：45830087 阅读：8 留言：0更新日期：2025-07-15 22:37

本申请公开了一种高细胞毒性抗肿瘤MAIT细胞的培养体系及其应用，属于免疫细胞培养技术领域。该培养体系包括IL‑2、IL‑15、αCD28抗体、IL‑12、IL‑18、IL‑23、5‑OP‑RU、IL‑7、Tα1；其中：IL‑2、IL‑15和αCD28抗体是维持T细胞扩增的基础细胞因子；IL‑12、IL‑18和IL‑23是非特异性激活MAIT细胞表面因子受体的刺激剂；5‑OP‑RU是特异性激活MAIT细胞的刺激剂；IL‑7和Tα1是维持MAIT细胞稳态和抗肿瘤生物活性的关键因子。将该培养体系用于以外周血单个核细胞为来源培养MAIT细胞，在体外实现快速扩增MAIT细胞的同时，维持了MAIT细胞的高细胞毒性及抗肿瘤生物活性。并且，该扩增操作方法简便，可迅速扩增出大量MAIT细胞，为深入开展MAIT细胞相关研究及大规模临床治疗奠定基础。

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【技术实现步骤摘要】

本申请属于免疫细胞培养，具体涉及一种高细胞毒性抗肿瘤mait细胞的培养方法及其应用。

技术介绍

1、黏膜相关恒定t细胞(mucosal-associated invariant t cell，mait)是新发现的一类表达半恒定tcr的非常规免疫t细胞，广泛分布于人体血液、肠道固有层淋巴组织及肝脏组织中，占健康人外周血t细胞的1～10％，在粘膜中特别是肝脏中含量极为丰富(约占肝内t细胞的50％)。既往的研究已证实：mait细胞在人体黏膜稳态和呼吸道感染性疾病中发挥关键作用，能够迅速协助机体抵御细菌、真菌、病毒等病原体的感染(journal ofinflammation 21.1(2024):6.)。最新的研究发现，mait细胞还发挥重要的抗肿瘤免疫作用：通过mr1分子识别肿瘤细胞表达的代谢产物，直接识别并攻击肿瘤细胞；通过释放穿孔素和颗粒酶等细胞毒性分子，或通过fas/fasl途径诱导肿瘤细胞凋亡；产生细胞因子(如ifn-γ、tnf-α)增强抗肿瘤免疫反应；与dc细胞、nk细胞、巨噬细胞和其他效应t细胞协同，增强对肿瘤细胞的杀伤作用。此外...

【技术保护点】

1.一种高细胞毒性抗肿瘤MAIT细胞的培养体系，其特征在于，所述培养体系包括MAIT完全培养基和添加剂，其中，

2.根据权利要求1所述的高细胞毒性抗肿瘤MAIT细胞的培养体系，其特征在于，各添加剂的浓度为：

3.根据权利要求2所述的高细胞毒性抗肿瘤MAIT细胞的培养体系，其特征在于，各添加剂的浓度为：

4.根据权利要求1-3任一所述的高细胞毒性抗肿瘤MAIT细胞的培养体系，其特征在于，所述无血清基础培养基包括：KBM 581培养基，或将AIM-V培养基和RMPI 1640培养基等体积1:1混合；所述灭活血浆添加量为2～3％。