基因工程化尿酸氧化酶突变体及其应用制造技术

技术编号:45770998 阅读:34 留言:0更新日期:2025-07-11 19:51
本申请涉及基因工程化尿酸氧化酶突变体及其应用,属于生物技术和生物工程领域。本发明专利技术以野生型尿酸氧化酶基因为模板,采用蛋白质工程策略,获得尿酸氧化酶突变体文库,并通过建立显色定性初选和吸光度法定量筛选的高通量筛选方式,筛选出多种高效降解尿酸的基因工程化尿酸氧化酶突变体,所获得相比野生型具有高酶活的尿酸氧化酶突变体,具有重要的工业生产和医药应用价值,具有开发新型降尿酸药物或药物组合的良好前景。

【技术实现步骤摘要】

本申请涉及基因工程化尿酸氧化酶突变体及其应用,属于生物技术和生物工程。


技术介绍

1、尿酸氧化酶是生物体嘌呤代谢途径中十分重要的酶,它能够催化尿酸的氧化分解,生成尿囊素,尿囊素易溶于水,水溶性是尿酸的近百倍,因此尿酸氧化酶可以快速直接地降低生物体内的尿酸水平,缓解尿酸蓄积。然而,在漫长的进化过程中,人科动物的尿酸氧化酶逐渐失去活性,变为假基因,导致人体内不存在功能活性的尿酸氧化酶,当人体内尿酸浓度长期处于高水平状态时,会引发高尿酸血症,血尿酸水平过高还会造成尿酸盐结晶在关节中沉积从而引发痛风。

2、尿酸氧化酶是一种新型的治疗高尿酸血症和痛风的药物,不仅能快速降低人体血液尿酸水平,还能促进已形成的痛风石溶解,对治疗高尿酸血症和痛风具有良好的应用前景。目前上市的尿酸氧化酶药物主要有两类,一类是黄曲霉(aspergillus flavus)来源重组尿酸氧化酶(afuox)研制而成的拉布立酶和elitek,分别于2001年和2002年在国外上市,用于治疗肿瘤溶解综合征引起的高尿酸血症,虽然这两种药物能够有效地降低血液中尿酸水平,减少尿酸结晶在关节和软组本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种基因工程化尿酸氧化酶,其特征在于,所述基因工程化尿酸氧化酶包括对第5、22、24、49、56、73、97、101、139、148、190、198、199、218、226、237、239、242、244、274、275、287、299、300和302位氨基酸中的一个或多个位点进行取代,其中氨基酸位置参考SEQ ID:No.1编号。

2.根据权利要求1所述的基因工程化尿酸氧化酶,其特征在于,所述基因工程化尿酸氧化酶包括对权利要求1所述氨基酸位点中的两个、三个、四个、五个、或六个位点或其组合进行取代,其中氨基酸位置参考SEQ ID:No.1编号。

3.根据权利要...

【技术特征摘要】

1.一种基因工程化尿酸氧化酶,其特征在于,所述基因工程化尿酸氧化酶包括对第5、22、24、49、56、73、97、101、139、148、190、198、199、218、226、237、239、242、244、274、275、287、299、300和302位氨基酸中的一个或多个位点进行取代,其中氨基酸位置参考seq id:no.1编号。

2.根据权利要求1所述的基因工程化尿酸氧化酶,其特征在于,所述基因工程化尿酸氧化酶包括对权利要求1所述氨基酸位点中的两个、三个、四个、五个、或六个位点或其组合进行取代,其中氨基酸位置参考seq id:no.1编号。

3.根据权利要求1或2所述的基因工程化尿酸氧化酶,其特征在于,所述基因工程化尿酸氧化酶与seq id:no.1具有至少85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或99%的序列同一性。

4.一种高酶活尿酸氧化酶突变体的高通量筛选方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:

5.根据权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员:吕雪峰徐卉芳薛宇王晓文刘仲琦梁伟男
申请(专利权)人:中国科学院青岛生物能源与过程研究所
类型:发明
国别省市:

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