一种环糊精糖基转移酶突变体及其在合成莱鲍迪苷RI中的应用制造技术

本发明专利技术属于基因工程和酶工程技术领域，具体涉及一种环糊精糖基转移酶突变体及其在合成莱鲍迪苷RI中的应用。具体的，本发明专利技术利用定向进化理论对酶分子进行改造，从而成功获得环糊精糖基转移酶突变体。同时利用所述环糊精糖基转移酶突变体，以廉价易得的环糊精作为糖基供体，替换成本高昂的UDP‑葡萄糖，并且催化效率有了较大的提升，转化率达到98.8%。该反应为制备莱鲍迪苷RI开辟了新的途径，反应的产物得率高，制备工艺简单，适用于工业化生产，具有广阔的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于基因工程和酶工程，具体涉及一种环糊精糖基转移酶突变体及其在合成莱鲍迪苷ri中的应用。

技术介绍

1、甜菊糖苷是一种二萜类化合物，以二萜类甜菊醇为基本骨架。甜菊糖苷主要存在于甜叶菊叶片中，其叶片中含有甜菊苷、莱鲍迪苷ra、莱鲍迪苷rb、莱鲍迪苷rd、莱鲍迪苷re、莱鲍迪苷ri、莱鲍迪苷rm等多种天然甜菊糖苷，其中甜菊苷(stevioside)应用广泛，虽然该类产品甜度达到蔗糖的300～600倍，仍然存在苦涩后味等不利缺点，口感有待改进。莱鲍迪苷ri其甜度和口感皆佳，并且热量低，是目前公认理想的甜菊糖苷产品。莱鲍迪苷ri在原植物中含量非常低，通过植物提取纯化的方式成本巨大，目前的产量远远不能够满足市场需求。

2、环糊精糖基转移酶(cyclodextrin glycosyltransferase，简称cgtase，ec2.4.1.19)，属于α-环糊精酶家族，已被证实是一种多功能的酶，可催化四个反应，分别为水解反应、歧化反应、环化反应和偶联反应。cgtase 转糖基反应显著，水解反应微弱，是典型的转苷酶。歧化反应和偶联反应是分子间转糖基本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种环糊精糖基转移酶突变体，其特征在于，所述环糊精糖基转移酶突变体为环糊精糖基转移酶突变体M1和/或环糊精糖基转移酶突变体M2；

2.一种核酸分子，其特征在于，所述核酸分子编码权利要求1所述的环糊精糖基转移酶突变体。

3.一种表达盒，其特征在于，所述表达盒包含权利要求2所述核酸分子。

4.一种重组载体，其特征在于，所述重组载体包含权利要求2所述核酸分子。

5.一种重组微生物，其特征在于，所述重组微生物包含权利要求2所述核酸分子或权利要求4所述重组载体。

6.如权利要求5所述重组微生物，其特征在于，所述重组微生物为重组大肠杆菌...

【技术特征摘要】

1.一种环糊精糖基转移酶突变体，其特征在于，所述环糊精糖基转移酶突变体为环糊精糖基转移酶突变体m1和/或环糊精糖基转移酶突变体m2；

2.一种核酸分子，其特征在于，所述核酸分子编码权利要求1所述的环糊精糖基转移酶突变体。

3.一种表达盒，其特征在于，所述表达盒包含权利要求2所述核酸分子。

4.一种重组载体，其特征在于，所述重组载体包含权利要求2所述核酸分子。

5.一种重组微生物，其特征在于，所述重组微生物包含权利要求2所述核酸分子或权利要求4所述重组载体。

6.如权利要求5所述重组微生物，其特征在于，所述重组微生物为重组大肠杆菌。

7.权利要求1所述环糊精糖基转移酶突变体、权利要求2所述核...

【专利技术属性】
技术研发人员：李清华，蒋怡，田瑶，聂在建，程保华，郑海军，韦红夫，盖晓燕，
申请(专利权)人：山东三元生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：