【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
技术介绍
技术实现思路
1、本公开部分地基于基因编辑系统的开发，所述基因编辑系统包含逆转录酶、核酸酶或切口酶以及向导rna或pegrna。
2、本文描述了融合蛋白，其包含使用接头与逆转录酶连接的切口酶，其中所述逆转录酶与seq id no:161-629、767-1220、1959-2522和2582-2585中的任一个包含至少约80％序列同一性。
3、本文描述了融合蛋白，其包含使用接头与逆转录酶连接的核酸酶，其中所述逆转录酶与seq id no:161-629、767-1220、1959-2522和2582-2585中的任一个包含至少约80％序列同一性。
4、本文描述了融合蛋白，其包含使用接头与逆转录酶连接的经催化死亡的核酸酶，其中所述逆转录酶与seq id no:161-629、767-1220、1959-2522和2582-2585中的任一个包含至少约80％序列同一性。
5、本文描述了基因编辑系统，其包含：a)切口酶；b)向导核酸，所述向导核酸被...
【技术保护点】
1.一种融合蛋白，其包含使用接头与逆转录酶连接的切口酶，其中所述逆转录酶与SEQID NO:161-629、767-1220、1959-2522和2582-2585中的任一个包含至少约80％序列同一性。
2.一种融合蛋白，其包含使用接头与逆转录酶连接的核酸酶，其中所述逆转录酶与SEQID NO:161-629、767-1220、1959-2522和2582-2585中的任一个包含至少约80％序列同一性。
3.一种融合蛋白，其包含使用接头与逆转录酶连接的经催化死亡的核酸酶，其中所述逆转录酶与SEQ ID NO:161-629、767-1220、1...
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种融合蛋白，其包含使用接头与逆转录酶连接的切口酶，其中所述逆转录酶与seqid no:161-629、767-1220、1959-2522和2582-2585中的任一个包含至少约80％序列同一性。
2.一种融合蛋白，其包含使用接头与逆转录酶连接的核酸酶，其中所述逆转录酶与seqid no:161-629、767-1220、1959-2522和2582-2585中的任一个包含至少约80％序列同一性。
3.一种融合蛋白，其包含使用接头与逆转录酶连接的经催化死亡的核酸酶，其中所述逆转录酶与seq id no:161-629、767-1220、1959-2522和2582-2585中的任一个包含至少约80％序列同一性。
4.一种基因编辑系统，其包含：
5.根据权利要求4所述的基因编辑系统，其中所述切口酶是经修饰的核酸内切酶。
6.根据权利要求5所述的基因编辑系统，其中所述经修饰的核酸内切酶是ii型crispr核酸内切酶。
7.根据权利要求5所述的基因编辑系统，其中所述经修饰的核酸内切酶是v型crispr核酸内切酶。
8.根据权利要求6至7中任一项所述的基因编辑系统，其中所述ii型crispr核酸内切酶或所述v型crispr核酸内切酶具有切口酶活性。
9.根据权利要求5所述的基因编辑系统，其中所述经修饰的核酸内切酶选自由以下组成的组：spcas9(h840a)、spcas9(d10a)、nmg3-6(d13a)、nmg3-6(h586a)、nmg3-6(n609a)、cas12a和mg29-1。
10.根据权利要求5所述的基因编辑系统，其中所述经修饰的核酸内切酶与seq id no:152-154中的任一个包含至少约80％序列同一性。
11.根据权利要求4至10中任一项所述的基因编辑系统，其中所述切口酶和所述逆转录酶是融合的。
12.根据权利要求4至10中任一项所述的基因编辑系统，其中所述切口酶和所述逆转录酶是通过接头连接的。
13.根据权利要求12所述的基因编辑系统，其中所述接头包含至少10个、20个或30个氨基酸。
14.根据权利要求12所述的基因编辑系统，其中所述接头包含约30-35个氨基酸。
15.根据权利要求12所述的基因编辑系统，其中所述接头包含约30个氨基酸。
16.根据权利要求12所述的基因编辑系统，其中所述接头与seq id no:103包含至少80％序列同一性。
17.根据权利要求12所述的基因编辑系统，其中所述接头与seq id no:155-160中的任一个包含至少80％序列同一性。
18.根据权利要求4至10中任一项所述的基因编辑系统，其中所述切口酶和所述逆转录酶是不连接的。
19.根据权利要求4至18中任一项所述的基因编辑系统，其中所述向导核酸包含间隔子序列和crrna。
20.根据权利要求4至19中任一项所述的基因编辑系统，其中所述向导核酸进一步包含逆转录酶模板(rtt)。
21.根据权利要求20所述的基因编辑系统，其中所述rtt中的碱基包含选自下组的大体积修饰：复合糖或复合氨基和/或与rna相容的其它修饰。
22.根据权利要求4至21中任一项所述的基因编辑系统，其中所述向导核酸进一步包含引物结合位点。
23.根据权利要求22所述的基因编辑系统，其中所述引物结合位点位于所述向导核酸的3'端上。
24.根据权利要求22至23中任一项所述的基因编辑系统，其中所述引物结合位点包含至少2个、4个、6个、8个、10个、13个、16个、20个、24个、28个、32个、36个、40个、45个、50个、55个、60个或65个核苷酸。
25.根据权利要求4至24中任一项所述的基因编辑系统，其中所述核酸酶与所述向导核酸非共价连接。
26.根据权利要求4至24中任一项所述的基因编辑系统，其中所述核酸酶与所述向导核酸共价连接。
27.根据权利要求4至24中任一项所述的基因编辑系统，其中所述核酸酶与所述向导核酸融合。
28.根据权利要求4至24中任一项所述的基因编辑系统，其进一步包含转座酶、整合酶或归巢核酸内切酶。
29.根据权利要求4至28中任一项所述的基因编辑系统，其进一步包含逆转录转座子。
30.根据权利要求4至29中任一项所述的基因编辑系统，其中所述逆转录酶包含的持续合成能力是莫洛尼鼠白血病病毒(mmlv)逆转录酶的持续合成能力的至少约2倍。
31.根据权利要求4至29中任一项所述的基因编辑系统，其中所述逆转录酶包含的持续合成能力是莫洛尼鼠白血病病毒(mmlv)逆转录酶的持续合成能力的至多约1/2。
32.根据权利要求4至31中任一项所述的基因编辑系统，其中所述逆转录酶包含的错误率小于约2.5％、2.0％、1.5％、1％、0.5％、0.25％、0.10％或0.05％。
33.根据权利要求4至32中任一项所述的基因编辑系统，其中与莫洛尼鼠白血病病毒(mmlv)逆转录酶相比，所述逆转录酶包含的错误率小于约2.5％、2.0％、1.5％、1％、0.5％、0.25％、0.10％或0.05％。
34.一种基因编辑系统，其包含：
35.根据权利要求34所述的基因编辑系统，其中所述核酸酶是双链核酸酶。
36.根据权利要求34至35中任一项所述的基因编辑系统，其中所述核酸酶是ii型crispr核酸内切酶。
37.根据权利要求36所述的基因编辑系统，其中所述crispr核酸内切酶是cas9。
38.根据权利要求37所述的基因编辑系统，其中所述cas9是经催化死亡的cas9(dcas9)。
39.根据权利要求34至38中任一项所述的基因编辑系统，其中所述核酸酶和所述逆转录酶是融合的。
40.根据权利要求34至38中任一项所述的基因编辑系统，其中所述核酸酶和所述逆转录酶是通过接头连接的。
41.根据权利要求40所述的基因编辑系统，其中所述接头包含至少10个、20个或30个氨基酸。
42.根据权利要求40所述的基因编辑系统，其中所述接头包含约30-35个氨基酸。
43.根据权利要求40所述的基因编辑系统，其中所述接头包含约30个氨基酸。
44.根据权利要求40所述的基因编辑系统，其中所述接头与seq id no:103包含至少80％序列同一性。
45.根据权利要求40所述的基因编辑系统，其中所述接头与seq id no:155-160中的任一个包含至少80％序列同一性。
46.根据权利要求34至38中任一项所述的基因编辑系统，其中所述核酸酶和所述逆转录酶是不连接的。
47.根据权利要求34至46中任一项所述的基因编辑系统，其中...
【专利技术属性】
技术研发人员：布莱恩·C·托马斯，利萨·亚历山大，科塔基·巴尔萨雷，克利斯多佛·布朗，辛迪·卡斯泰勒，丹妮拉·S·A·戈尔茨曼，苏拉布·库尔卡尼，莎拉·拉佩里埃，利安娜·蒙泰莱奥内，玛丽亚·约瑟·索托孔特雷拉斯，莫拉伊玛·特莫彻迪亚兹，安努·托马斯，玛丽·凯特琳·赵，丽贝卡·拉莫特，
申请(专利权)人：宏基因组学公司，
类型：发明
国别省市：
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