新型Cas12a核酸酶BEST3及其应用制造技术

本发明专利技术涉及基因工程技术领域，具体涉及一种新型Cas12a核酸酶‑BEST3及其在基因编辑和核酸检测中的应用。本发明专利技术提供一种新型Cas12a蛋白，即BEST3，其可作为基因编辑工具酶并可用于核酸检测，为生物体内靶向基因编辑及核酸检测应用提供了更多可应用的工具酶，并针对具体应用提供了示范性实验方案或相关生化特性分析。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及基因工程，具体涉及一种新型cas12a核酸酶best3及其在基因编辑和核酸检测中的应用。

技术介绍

1、crispr-cas系统广泛存在于细菌、古细菌中，是原核生物的一种适应性免疫系统，可抵御外源病毒或质粒dna的入侵。根据效应子模块蛋白组成差异分为class 1和class 2两类系统，其中class 1crispr-cas系统利用多蛋白效应复合物进行靶向识别与切割，class 2crispr-cas系统利用单一蛋白进行靶向识别与切割(makarova,k.s.,wolf,y.i.,iranzo,j.,shmakov,s.a.,alkhnbashi,o.s.,brouns,s.j.j.,charpentier,e.,cheng,d.,haft,d.h.,horvath,p.,et al.(2020).evolutionary classification of crispr-cassystems:a burst of class 2and derived variants.nat rev microbiol 18,67-83.)。相比于zf本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种新型Cas12a蛋白，其特征在于，所述Cas12a蛋白为具有：

2.根据权利要求1所述的Cas12a蛋白，其特征在于，所述PAM位点的特征为5’-(Y)TTN-3’，N表示A、G、C、T中的任一种，Y表示T或C。

3.一种融合蛋白，其中，所述融合蛋白包括权利要求1或2所述的Cas12a蛋白和其他的修饰部分。

4.一种分离的多核苷酸，其特征在于，所述多核苷酸为编码权利要求1或2所述的Cas12a蛋白的多核苷酸或编码权利要求3所述的融合蛋白的多核苷酸；

5.一种表达载体，其特征在于，所述表达载体包含权利要求4所述的分离的多核苷酸。...

【技术特征摘要】

1.一种新型cas12a蛋白，其特征在于，所述cas12a蛋白为具有：

2.根据权利要求1所述的cas12a蛋白，其特征在于，所述pam位点的特征为5’-(y)ttn-3’，n表示a、g、c、t中的任一种，y表示t或c。

3.一种融合蛋白，其中，所述融合蛋白包括权利要求1或2所述的cas12a蛋白和其他的修饰部分。

4.一种分离的多核苷酸，其特征在于，所述多核苷酸为编码权利要求1或2所述的cas12a蛋白的多核苷酸或编码权利要求3所述的融合蛋白的多核苷酸；

5.一种表达载体，其特征在于，所述表达载体包含权利要求4所述的分离的多核苷酸。

6.根据权利要求5所述的表达载体，其特征在于，所述表达载体进一步包括根据靶序列以及pam序列设计的crrna。

7.一种crispr-cas系统，其特征在于，所述crispr-cas系统包括权利要求1或2所述的cas12a蛋白以及至少一种crrna，所述crrna包括能够结合权利要求1或2所述的cas12a蛋白的骨架区和能够靶向靶序列的引导序列。

8.一种组合物，其特征在于，所述组合物包含：

9.一种宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞包含权利要求1或2所述的cas12a蛋白，或权利要求3所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：蓝虹霞，李岸多，章文蔚，申雪纯，刘传，黄蕾，祁琛，李百涛，江媛，王欧，郑越，
申请(专利权)人：深圳华大生命科学研究院，
类型：发明
国别省市：