一种小亚璃眼蜱防御素及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种小亚璃眼蜱防御素及其制备方法和应用，涉及生物技术领域。小亚璃眼蜱防御素的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，本发明专利技术还提供了小亚璃眼蜱防御素的制备方法，包括以下步骤：以PET‑32a质粒为载体骨架，分析设计带有酶切位点的PCR引物，通过PCR扩增出防御素基因片段，将酶切后的防御素基因插入到PET‑32a质粒中，得到含有目的蛋白的表达载体，转化感受态细胞，筛选菌株，诱导目的蛋白表达。本发明专利技术提供的方法可获得大量可溶性上清表达的重组防御素，并通过酶切获得无任何标签接头残留的高纯度防御素产物，有效解决了现有技术中存在的蛋白表达量不高、蛋白纯化困难、成本高昂且复性困难的问题。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物，具体涉及一种小亚璃眼蜱防御素及其制备方法和应用。

技术介绍

1、蜱(tick)作为一种专性吸血的体外寄生生物，不仅会对畜牧业造成经济损失，而且还能传播多种病原体给人类和动物，引发诸如莱姆病、巴贝斯虫病等严重疾病。小亚璃眼蜱(hyalomma anatolicum)广泛分布于新疆维吾尔自治区以南和以北，这种蜱类可携带并传播22种不同的病原微生物，其危害不容忽视。近年来的一些研究报道发现，蜱可采用各种抗菌肽作为有效的武器来抵御各类病原体。蜱体内的一些生物分子(抗菌肽、抗凝血分子、免疫调节肽、抗病毒肽、抗肿瘤肽等)又具有极其重要的研究及临床应用价值。因此，在应对蜱虫及其传播疾病的挑战过程中，寻找新型、有效的抗菌物质成为研究热点。

2、蜱类防御素作为生物体内天然存在的一类抗菌肽，其分子量一般为4-8kda，成熟肽部分具有保守的6个半胱氨酸残基形成3对分子内二硫键，大多为阳离子型多肽，具有广谱抗菌活性、相对低毒以及不易产生耐药性等优势，在抗菌领域展现出巨大的应用潜力。然而，由于蜱体内的天然防御素表达量低、分子量较小、分离和加工提纯困难本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种小亚璃眼蜱防御素，其特征在于，所述小亚璃眼蜱防御素的氨基酸序列如SEQID NO：1所示。

2.权利要求1所述的小亚璃眼蜱防御素的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

3.如权利要求2所述的小亚璃眼蜱防御素的制备方法，其特征在于，步骤S1中，所述质粒为PET-32a。

4.如权利要求2所述的小亚璃眼蜱防御素的制备方法，其特征在于，步骤S1中，所述肠激酶的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。

5.如权利要求2所述的小亚璃眼蜱防御素的制备方法，其特征在于，步骤S3中，所述感受态细胞为大肠杆菌DE3。

6.如权利要求2所述...

【技术特征摘要】

1.一种小亚璃眼蜱防御素，其特征在于，所述小亚璃眼蜱防御素的氨基酸序列如seqid no：1所示。

2.权利要求1所述的小亚璃眼蜱防御素的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

3.如权利要求2所述的小亚璃眼蜱防御素的制备方法，其特征在于，步骤s1中，所述质粒为pet-32a。

4.如权利要求2所述的小亚璃眼蜱防御素的制备方法，其特征在于，步骤s1中，所述肠激酶的氨基酸序列如seq id no：2所示...

【专利技术属性】
技术研发人员：呼尔查，罗亭祥，郭庆勇，巴音查汗·盖力克，胡政香，马祯，杨德鹏，杨森，
申请(专利权)人：新疆农业大学，
类型：发明
国别省市：