体外选择性扩增自然杀伤T细胞的方法、自然杀伤T细胞及其用途技术

本发明专利技术提供了一种体外选择性扩增自然杀伤T细胞的方法，包括：(1)从外周血获得外周血单个核细胞；(2)使用细胞培养基将外周血单个核细胞配制成第一细胞悬液，采用贴壁法进行处理，处理完成后收集未贴壁细胞悬液；(3)从未贴壁细胞悬液离心收集未贴壁细胞，使用细胞培养基将未贴壁细胞配制成第二细胞悬液，进行I型自然杀伤T细胞增殖。本发明专利技术还提供了由该方法获得的自然杀伤T细胞以及自然杀伤T细胞的用途。本发明专利技术的方法操作简单，能够以少量外周血单个核细胞高效扩增得到高纯度和高效应能力的I型自然杀伤T细胞。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于细胞生物学，具体地，本专利技术涉及一种体外选择性扩增自然杀伤t细胞的方法，由该方法获得的自然杀伤t细胞以及自然杀伤t细胞的用途。

技术介绍

1、自然杀伤t细胞(natural killer t cell，nkt cell)是一类限制性识别cd1d分子提呈的脂质抗原的αβ-t细胞。因为同时表达t细胞受体(t cell receptor，tcr)和自然杀伤细胞(natural killer cell，nk细胞)受体，所以，nkt细胞具有固有免疫和适应性免疫的反应特征。具体地，nkt细胞与t细胞一样通过tcr识别抗原，特异性识别由mhc类似分子cd1d提呈的脂质抗原，并与nk细胞一样能够迅速反应，杀伤靶细胞，同时产生一系列细胞因子和趋化因子，因而发挥重要的免疫调控作用，参与抗肿瘤、抗感染、抗自身免疫性疾病的免疫反应。其中，固定转录tcr vα24jα18的αβ-t细胞，又被称为i型自然杀伤细胞，是一种研究最为深入的nkt细胞。vα24优先与vβ11组合形成完整的tcr，α-半乳糖酰基鞘氨醇(α-galactosylceramide，α-galcer本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种体外选择性扩增自然杀伤T细胞的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述第一细胞悬液的细胞浓度是1×106个/mL至2×106个/mL；所述第二细胞悬液的细胞浓度3×105至1×106个/mL。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(2)中，所述采用贴壁法进行处理是通过包括以下步骤的方法进行的：

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(3)中，所述I型自然杀伤T细胞增殖是通过包括以下步骤的方法进行的：

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述荷载特异性刺激剂的...

【技术特征摘要】

1.一种体外选择性扩增自然杀伤t细胞的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述第一细胞悬液的细胞浓度是1×106个/ml至2×106个/ml；所述第二细胞悬液的细胞浓度3×105至1×106个/ml。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(2)中，所述采用贴壁法进行处理是通过包括以下步骤的方法进行的：

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(3)中，所述i型自然杀伤t细胞增殖是通过包括以下步骤的方法进行的：

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述荷载特异性刺激剂的cd1d表达细胞是由步骤(2)中贴壁法处理得到的贴壁细胞经过诱导分化获得的荷载α-galcer的dc细胞；优选地，所述荷载α-galcer的dc细胞的制备方法包括：

6.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，向所述第二细胞悬液中加入的特异性刺激剂...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐建青，张晓燕，王婧，
申请(专利权)人：上海鑫湾生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：