一种欧李果实中原花青素的测定方法技术

技术编号:45310709 阅读:7 留言:0更新日期:2025-05-16 14:52
本发明专利技术属于原花青素测定技术领域,具体涉及一种欧李果实中原花青素的测定方法。本发明专利技术使用原花青素标准品制作标准曲线,与样品的化学组成更接近,从而更准确反映样品中原花青素的实际含量,避免因结构差异导致的测定偏差,且引入酶标仪高通量检测方法,结合香草醛显色法,一次性检测多个样品,大幅提升样品检测速度与通量,为样品含量测定提供快速准确的分析工具。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于原花青素测定,具体涉及一种欧李果实中原花青素的测定方法


技术介绍

1、原花青素是植物中广泛存在的一大类多酚类化合物的总称,具有强抗氧化、消除自由基的作用,可有效消除超氧阴离子自由基和羟基自由基,也参与磷酸、花生四烯酸的代谢和蛋白质磷酸化,保护脂质不发生过氧化损伤;是强有力的金属螯合剂,可螯合金属离子,在体内形成惰性化合物;保护和稳定维生素c,有助于维生素c的吸收和利用。原花青素分布广泛,存在于许多植物的皮、壳、籽、核、花、叶中,葡萄籽中原花青素含量最高,种类丰富。

2、现有技术以儿茶素的当量表示原花青素的含量,儿茶素是原花青素的基本单体,而原花青素通常为由儿茶素和表儿茶素通过聚合形成的低聚体和高聚体混合物。使用儿茶素作为标准品,无法完全代表多聚体原花青素的实际结构和特性。结果可能低估了样品中高聚合度原花青素的含量。且现有原花青素含量的检测多依赖单一的分光光度计逐样分析检测,样品通量较低且操作烦琐,效率低、耗时长,难以满足高效分析的需求。


技术实现思路

1、为解决上述问题,本专利技术提供了一种欧李果实中原花青素的测定方法,包括以下步骤:

2、(1)样品液制备:选择成熟、无霉变的果实欧李果实,清除果实表面的泥土、杂质和污染物,去除核及果柄,得到欧李果实样品;将浓盐酸加入乙醇溶液中,充分混匀,即为提取液;向欧李样品中加入提取液,充分研磨后超声处理,离心分离后即得原花青素样品液;

3、(2)绘制标准曲线;

4、(3)样品测定:取提取的原花青素样品液100μl,加入试管中,加入600μl浓度为0.04g/ml的香草醛甲醇溶液,充分摇匀后加入300μl浓盐酸,再次充分摇匀后,将样品测定管放入30℃水浴中反应20分钟,确保充分显色。使用提取液代替样品作为空白管;取反应液200μl于96孔板中,用酶标仪检测波长500nm处样品管和空白管的吸光值;

5、(4)数据计算:根据公式计算样品中原花青素含量。

6、进一步的,步骤(1)中所述浓盐酸的体积分数为36%~38%。

7、进一步的,步骤(1)中所述乙醇溶液为40%的乙醇水溶液。

8、进一步的,步骤(1)中所述浓盐酸与乙醇溶液的比例为1:400。

9、进一步的,步骤(1)中所述欧李样品与提取液的质量体积比为0.6g:10ml。

10、进一步的,步骤(1)中所述超声处理为:在25℃的条件下超声提取30min;超声波的频率设为40khz,功率为200w。

11、进一步的,步骤(1)中所述离心为5000r/min离心10min。

12、进一步的,步骤(3)中所述浓盐酸浓度为36%~38%。

13、本专利技术具有以下有益效果:

14、本专利技术使用原花青素标准品制作标准曲线,与样品的化学组成更接近,从而更准确反映样品中原花青素的实际含量,避免因结构差异导致的测定偏差,且引入酶标仪高通量检测方法,结合香草醛显色法,一次性检测多个样品,大幅提升样品检测速度与通量,为样品含量测定提供快速准确的分析工具。

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【技术保护点】

1.一种欧李果实中原花青素的测定方法,其特征在于,包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的测定方法,其特征在于,步骤(1)中所述浓盐酸的体积分数为36%~38%。

3.根据权利要求1所述的测定方法,其特征在于,步骤(1)中所述乙醇溶液为40%的乙醇水溶液。

4.根据权利要求1所述的测定方法,其特征在于,步骤(1)中所述浓盐酸与乙醇溶液的比例为1:400。

5.根据权利要求1所述的测定方法,其特征在于,步骤(1)中所述欧李样品与提取液的质量体积比为0.6g:10mL。

6.根据权利要求1所述的测定方法,其特征在于,步骤(1)中所述超声处理为:在25℃的条件下超声提取30min;超声波的频率设为40kHz,功率为200W。

7.根据权利要求1所述的测定方法,其特征在于,步骤(1)中所述离心为5000r/min离心10min。

8.根据权利要求1所述的测定方法,其特征在于,步骤(3)中所述浓盐酸浓度为36%~38%。

【技术特征摘要】

1.一种欧李果实中原花青素的测定方法,其特征在于,包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的测定方法,其特征在于,步骤(1)中所述浓盐酸的体积分数为36%~38%。

3.根据权利要求1所述的测定方法,其特征在于,步骤(1)中所述乙醇溶液为40%的乙醇水溶液。

4.根据权利要求1所述的测定方法,其特征在于,步骤(1)中所述浓盐酸与乙醇溶液的比例为1:400。

5.根据权利要求1所述的测定方法,其特征在于,步...

【专利技术属性】
技术研发人员:郭金丽张莉李晓艳李静汝郭炳成
申请(专利权)人:内蒙古农业大学
类型:发明
国别省市:

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