【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物医药，尤其涉及一种念珠菌药物耐受的筛查方法。
技术介绍
1、念珠菌血症是一种严重的侵袭性真菌感染，特别是由热带念珠菌引起的念珠菌血症，因其高耐药性而使得临床治疗变得更加困难。近年来，中国分离的热带念珠菌对氟康唑的耐药性显著上升，从5.7％升高至31.8％，特别是在某些医院的造血干细胞移植患者中，分离的热带念珠菌对唑类药物的耐药性甚至超过了80％。因此，棘白菌素类药物已经成为治疗念珠菌血症的首选一线药物。然而尽管临床微生物实验室提供的体外药敏实验报告显示热带念珠菌对棘白菌素类药物敏感，但在临床应用中，如卡泊芬净这类常用的棘白菌素类药物，对一部分患者的治疗效果并不理想，预后不佳。
2、在临床微生物实验室中，针对念珠菌感染患者分离的念珠菌进行的药敏实验普遍采用微量肉汤稀释法。该方法基于测定念珠菌对不同抗真菌药物的最低抑菌浓度(mic值)，以判断念珠菌对这些药物是“敏感”还是“耐药”。据此，临床医生会依据实验室提供的药敏试验报告来决定给病人的用药方案。然而，越来越多的临床案例显示，即使药敏试验报告显示念珠菌对卡泊芬净(一种常用的棘白菌素类药物)“敏感”，部分念珠菌血症患者使用卡泊芬净治疗后的实际效果并不理想，表现为持续的念珠菌血症和高死亡率。这种情况揭示了现有药敏实验方法的局限性，即实验室报告为敏感的菌株可能实际上对棘白菌素类药物存在耐受现象，这可能导致在单药治疗时出现治疗失败的情况。
技术实现思路
1、(一)解决的技术问题
2、鉴于此，本专利技术
3、(二)技术方案
4、为了实现上述目的，本专利技术提供了一种念珠菌药物耐受的筛查方法，所述筛查方法包括观察念珠菌菌株接触药物后的形态特征。
5、在一个实施例中，所述筛查方法仅涉及非诊断目的的筛查。
6、在一个实施例中，所述形态特征包括细胞形态、大小、菌落形态中的一种或其组合。
7、在一个实施例中，所述形态特征是细胞形态。
8、在一个实施例中，所述细胞形态为多细胞聚集形态。
9、在一个实施例中，所述筛查方法还包括在观察念珠菌菌株接触药物前进行药物敏感性试验。
10、在一个实施例中，所述药物敏感性实验包括微量肉汤稀释法。
11、在一个实施例中，所述药物敏感性实验结果显示敏感。
12、在一个实施例中，所述药物敏感性实验结果显示耐药。
13、在一个实施例中，所述念珠菌是新鲜分离的。
14、在一个实施例中，所述念珠菌是冰冻复苏的。
15、在一个实施例中，所述念珠菌包括白色念珠菌、热带念珠菌、光滑念珠菌、克柔念珠菌、近平滑念珠菌、季也蒙念珠菌、葡萄牙念珠菌、乳酒念珠菌、皱褶念珠菌、都柏林念珠菌、星形念珠菌、假热带念珠菌、耳念珠菌中的一种或其组合。
16、在一个实施例中，所述念珠菌包括热带念珠菌和耳念珠菌。
17、在一个实施例中，所述药物是抗真菌药物。
18、在一个实施例中，所述抗真菌药物包括多烯类、唑类、棘白菌素类、丙烯胺类、嘧啶类中的一种或其组合。
19、在一个实施例中，所述抗真菌药物是棘白菌素类。
20、在一个实施例中，所述棘白菌素类包括卡泊芬净和米卡芬净。
21、在一个实施例中，所述棘白菌素类是卡泊芬净。
22、在一个实施例中，所述念珠菌源自全血、血浆、血清、红细胞级分、唾液、脑脊液、精液、粪便、尿液、鼻拭子、伤口拭子、皮肤拭子、直肠拭子、胆汁、淋巴痰、灌洗液中的一种或其组合。
23、在一个实施例中，所述念珠菌源自选自全血、血浆、血清中的一种或其组合。
24、(三)有益效果
25、本专利技术提供了一种念珠菌药物耐受的筛查方法，所述筛查方法包括观察念珠菌菌株接触药物后的形态特征。与现有技术相比，具备以下有益效果：
26、1、通过使用卡泊芬净处理临床分离的念珠菌，在显微镜下观察菌株的形态变化，即可快速有效地筛查出耐受棘白菌素类药物的念珠菌。
27、2、通过对经杀菌试验确认为耐受卡泊芬净的念珠菌株以及随机挑选的经验证为非耐受的念珠菌株进行了筛查方法有效性验证，正确率为100％。
28、(四)术语和定义
29、如本文所用，术语“药物耐受”是指真菌对药物的敏感性下降，导致药物对真菌的抑制或杀菌作用减弱的现象，并且该现象无法被临床微生物实验室开展的常规药物敏感性试验发现。例如，原本能够被低浓度药物有效抑制生长的真菌，在产生耐受后，需要更高浓度的药物才能产生相同的抑制效果，甚至在很高浓度下依然能够存活和繁殖，并且抗真菌药物mic值无差异。
30、如本文所用，“多细胞聚集形态”是指在念珠菌增殖过程中，芽生孢子因细胞分裂缺陷导致子细胞无法从母细胞上脱离，不断生成的子细胞在物理空间上相互靠近，聚集在一起，显微镜下观察像葡萄串一样的多细胞聚集形态。这些细胞可以是同一种形态大小，也可以是不同形态大小的细胞组合。这种聚集不是简单的细胞堆积，而是通过细胞分裂增殖过程中子细胞不断产生，进而聚集来实现的，并且通常会呈现出一定的结构和功能特征。
31、如本文所用，“热带念珠菌多个克隆”是指两个或两个以上从不同祖先细胞(热带念珠菌细胞)通过无性增殖产生的细胞群体。每个克隆内部的热带念珠菌细胞在遗传上相对一致，但不同克隆之间在基因组成、表型(如形态、生长速度、耐药性等)等方面可能存在差异。
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1.一种念珠菌药物耐受的筛查方法，其特征在于，所述筛查方法包括观察念珠菌菌株接触药物后的形态特征。
2.根据权利要求1所述的筛查方法，其特征在于，所述形态特征包括细胞形态、大小、菌落形态中的一种或其组合。
3.根据权利要求2所述的筛查方法，其特征在于，所述形态特征是细胞形态。
4.根据权利要求3所述的筛查方法，其特征在于，所述细胞形态为多细胞聚集形态。
5.根据权利要求1-4任意一项所述的筛查方法，其特征在于，所述念珠菌包括白色念珠菌、热带念珠菌、光滑念珠菌、克柔念珠菌、近平滑念珠菌、季也蒙念珠菌、葡萄牙念珠菌、乳酒念珠菌、皱褶念珠菌、都柏林念珠菌、星形念珠菌、假热带念珠菌、耳念珠菌中的一种或其组合。
6.根据权利要求5所述的筛查方法，其特征在于，所述念珠菌包括热带念珠菌和耳念珠菌。
7.根据权利要求1所述的筛查方法，其特征在于，所述药物是抗真菌药物。
8.根据权利要求7所述的筛查方法，其特征在于，所述抗真菌药物是棘白菌素类。
9.根据权利要求8所述的筛查方法，其特征在于，所述棘白菌素
10.根据权利要求9所述的筛查方法，其特征在于，所述棘白菌素类是卡泊芬净。
...【技术特征摘要】
1.一种念珠菌药物耐受的筛查方法，其特征在于，所述筛查方法包括观察念珠菌菌株接触药物后的形态特征。
2.根据权利要求1所述的筛查方法，其特征在于，所述形态特征包括细胞形态、大小、菌落形态中的一种或其组合。
3.根据权利要求2所述的筛查方法，其特征在于，所述形态特征是细胞形态。
4.根据权利要求3所述的筛查方法，其特征在于，所述细胞形态为多细胞聚集形态。
5.根据权利要求1-4任意一项所述的筛查方法，其特征在于，所述念珠菌包括白色念珠菌、热带念珠菌、光滑念珠菌、克柔念珠菌、近平滑念珠菌、季也蒙念珠菌、葡...
【专利技术属性】
技术研发人员：吴永琴，戴媛媛，
申请(专利权)人：安徽省立医院中国科学技术大学附属第一医院，
类型：发明
国别省市：
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