一种SARS-CoV-2假病毒载体构建验证方法技术

本发明专利技术涉及病毒检测技术领域，具体涉及一种SARS‑CoV‑2假病毒载体构建验证方法，包括基于新型冠状病毒选定靶标基因，将靶标基因的核苷酸序列串联，并克隆至慢病毒包装表达载体上，得到质粒；将质粒与二代慢病毒包装质粒转化大肠杆菌克隆菌株，扩大培养，提取无内毒素质粒；将无内毒素质粒共转染细胞，从转染细胞上清液中收集含有目的基因RNA的假病毒颗粒；对假病毒颗粒进行沉淀，弃掉上清液，使用病毒溶解液重悬浓缩；对靶标基因绘制标准曲线，对假病毒颗粒进行RNA提取、逆转录和荧光定量PCR，通过标准曲线计算假病毒滴度，得到假病毒，由于假病毒不具有传染性，但其基因组与真实病毒相似，该方法可以安全地在实验室中使用，减少了操作中的生物安全风险。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及病毒检测，尤其涉及一种sars-cov-2假病毒载体构建验证方法。

技术介绍

1、目前，新型冠状病毒(sars-cov-2)的检测方法主要依赖于核酸检测，特别是实时荧光定量pcr(rt-qpcr)。这一检测方法利用病毒的特定基因序列作为靶标，如n基因、e基因和orf1a/b基因，进行扩增和检测。现有的核酸检测技术具有高度的灵敏度和特异性，已经在全球范围内广泛应用于新冠病毒的诊断。

2、但现有新型冠状病毒(sars-cov-2)的检测方法在实际应用中，真实的病毒样本具有高度传染性，实验室操作存在较高的生物安全风险。

技术实现思路

1、本专利技术的目的在于提供一种sars-cov-2假病毒载体构建验证方法，旨在解决真实的新型冠状病毒样本具有高度传染性，实验室操作新型冠状病毒的检测存在较高的生物安全风险的问题。

2、为实现上述目的，本专利技术提供了一种sars-cov-2假病毒载体构建验证方法，包括以下步骤：

3、基于新型冠状病毒选定3个靶标基因，将3个所述靶标基因本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种SARS-CoV-2假病毒载体构建验证方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.如权利要求1所述的一种SARS-CoV-2假病毒载体构建验证方法，其特征在于；

3.如权利要求1所述的一种SARS-CoV-2假病毒载体构建验证方法，其特征在于；

4.如权利要求1所述的一种SARS-CoV-2假病毒载体构建验证方法，其特征在于；

5.如权利要求1所述的一种SARS-CoV-2假病毒载体构建验证方法，其特征在于；

【技术特征摘要】

1.一种sars-cov-2假病毒载体构建验证方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.如权利要求1所述的一种sars-cov-2假病毒载体构建验证方法，其特征在于；

3.如权利要求1所述的一种sars-cov-...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄为，唐文革，顾万江，孙全，赵华，王明月，谢武娟，
申请(专利权)人：重庆市疾病预防控制中心重庆市预防医学科学院，
类型：发明
国别省市：