一种天冬实时荧光定量PCR内参基因的筛选方法及应用技术

技术编号:45055329 阅读:22 留言:0更新日期:2025-04-22 17:38
本发明专利技术公开了一种天冬实时荧光定量PCR内参基因的筛选方法及应用,涉及分子生物学技术领域;步骤1,材料的获取:选取天冬植株进行采样,采样包括不同生长年限和不同组织部位;步骤2,天冬样品RNA的提取和cDNA模板的制备:将采集保存的样本在液氮中分别研磨成细粉,提取样品的总RNA,提取结果采用1%琼脂糖凝胶电泳验证其完整性。本发明专利技术基于天冬全长转录组数据,通过严格的内参基因筛选程序,首次从10个候选内参基因中确定在不同生长年限及不同组织部位的天冬样品表达最为稳定的内参基因,是天冬实时荧光定量PCR内参基因筛选及应用上的创新。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及分子生物学,尤其涉及一种天冬实时荧光定量pcr内参基因的筛选方法及应用。


技术介绍

1、(天冬的来源为百合科植物天门冬asparagus cochinchinensis(lour.)merr.的干燥块根,主产于我国的西南各省区,为四川内江地区道地药材。天冬以“天门冬”为正名始载于《神农本草经》,历代本草多以名沿用。2020版《中国药典》记载天冬味甘、苦,性寒,具有养阴润肺、清肺生津的功效。

2、天冬的现代化学成分研究发现其含有甾体皂苷、多糖、氨基酸等多种化学成分,其中甾体皂苷是天冬的主要化学成分。现代药理学研究表明天冬有抗肿瘤、抗氧化、抗菌、抗炎等药理作用,尤其是对于肺部损伤具有显著的疗效。随着分子生药学的发展与进步,天冬主要活性成分的生物合成和关键基因的功能研究越来越受到人们的重视。

3、实时荧光定量pcr(qrt-pcr)技术已经发展成为分子生物学领域内一种广泛采用的、快速且精确的基因表达定量分析工具。qrt-pcr实验结果的准确性受多种因素影响,包括rna质量、cdna合成效率、pcr扩增效率以及内参基因表达稳定本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种天冬实时荧光定量PCR内参基因的筛选方法,其特征在于,包括:

2.根据权利要求1所述的一种天冬实时荧光定量PCR内参基因的筛选方法,其特征在于,所述步骤1中,材料的获取包括如下步骤:

3.根据权利要求1所述的一种天冬实时荧光定量PCR内参基因的筛选方法,其特征在于,所述步骤2中,天冬样品RNA的提取和cDNA模板的制备包括如下步骤:

4.根据权利要求1所述的一种天冬实时荧光定量PCR内参基因的筛选方法,其特征在于,所述步骤3中,候选内参基因的选取与引物设计包括如下步骤:

5.根据权利要求1所述的一种天冬实时荧光定量PCR内参基因的筛...

【技术特征摘要】

1.一种天冬实时荧光定量pcr内参基因的筛选方法,其特征在于,包括:

2.根据权利要求1所述的一种天冬实时荧光定量pcr内参基因的筛选方法,其特征在于,所述步骤1中,材料的获取包括如下步骤:

3.根据权利要求1所述的一种天冬实时荧光定量pcr内参基因的筛选方法,其特征在于,所述步骤2中,天冬样品rna的提取和cdna模板的制备包括如下步骤:

4.根据权利要求1所述的一种天冬实时荧光定量pcr内参基因的筛选方法,其特征在于,所述步骤3中,候选内参基因的选取与引物设计包括如下步骤:

5.根据权利要求1所述的一种天冬实时荧光定量pcr内参基因的筛选方法,其特征在于,所述步骤4中,候选内参基因的qr...

【专利技术属性】
技术研发人员:沈刚张桐鄢贵宋启瑞殷洪林谭庆刍郑午曹冬
申请(专利权)人:成都市中草药研究所成都市卫生计生药械科技服务中心
类型:发明
国别省市:

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