一种宽pH适用范围的蛋白酶突变体及其用于制备胶原蛋白肽的用途制造技术

本发明专利技术属于酶工程技术领域，具体涉及一种宽pH适用范围的蛋白酶突变体及其用于制备胶原蛋白肽的用途。本发明专利技术的蛋白酶突变体是在丝氨酸蛋白酶原始序列的基础上进行突变后得到的。该蛋白酶突变体对胶原蛋白的最佳降解活性与突变前相当，且对反应中的pH条件具有更宽的适用范围。该蛋白酶突变体能够增强胶原蛋白提取率、简化工艺、降低工艺成本，具有很好的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于酶工程，具体涉及一种宽ph适用范围的蛋白酶突变体及其用于制备胶原蛋白肽的用途。

技术介绍

1、水产养殖及渔业链条蓬勃发展，鱼类产品的产量年年攀升，从而衍生出数量可观的鱼皮等副产品。鱼皮蕴含丰富的胶原蛋白，是制备胶原肽的优质原料。随着人们对胶原蛋白及胶原肽的渴求与日俱增，高效的制备方式成为研究热点。

2、丝氨酸蛋白酶，因其催化活性中心的关键位点丝氨酸而被命名，广泛分布于植物和微生物的世界。该类酶在中性或者碱性的条件下有很好的酶活，能将鱼皮胶原蛋白转化为小分子量的肽段。相比起化学法——依靠酸或碱来断开肽键，酶解制备方法的反应更温和，对于底物具备更高的识别及结合能力，能够更大程度地保持胶原肽的生物活性，为相关产业的发展带来新的契机。

3、在利用丝氨酸蛋白酶降解鱼皮胶原蛋白的过程中，随小分子量肽或氨基酸含量的增加，反应液的ph持续下降。而现有的丝氨酸蛋白酶的活性会随着ph的降低而发生明显的降低。因此，在工艺中需要不断向反应体系中补充碱溶液，保持ph恒定，这不仅使制备工艺繁琐，造成一定程度的环境污染问题，还会增加工艺的成本。因此本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种丝氨酸蛋白酶突变体，其特征在于：所述丝氨酸蛋白酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示，或与SEQ ID NO:2具有至少90％同一性。

2.一种用于编码权利要求1所述丝氨酸蛋白酶突变体的核酸分子，其特征在于：所述核酸分子的核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示，所述核酸分子是DNA、RNA或二者的嵌合体。

3.一种用于表达权利要求1所述丝氨酸蛋白酶突变体的载体，其特征在于：它包括SEQID NO:4所示的核苷酸序列和基础质粒。

4.按照权利要求3所述的载体，其特征在于：所述基础质粒选自pET系列、pQE系列、pGEX系列、pBAD系列...

【技术特征摘要】

1.一种丝氨酸蛋白酶突变体，其特征在于：所述丝氨酸蛋白酶突变体的氨基酸序列如seq id no:2所示，或与seq id no:2具有至少90％同一性。

2.一种用于编码权利要求1所述丝氨酸蛋白酶突变体的核酸分子，其特征在于：所述核酸分子的核苷酸序列如seq id no:4所示，所述核酸分子是dna、rna或二者的嵌合体。

3.一种用于表达权利要求1所述丝氨酸蛋白酶突变体的载体，其特征在于：它包括seqid no:4所示的核苷酸序列和基础质粒。

4.按照权利要求3所述的载体，其特征在于：所述基础质粒选自pet系列、pqe系列、pgex系列、pbad系列、prs系列、pbluescript系列、puc系列、pbr系列、pkt系列、pacyc系列；优选为pkt101。

5.一种用于制备丝氨酸蛋白酶突变体的基因工程菌，其特征在于：它...

【专利技术属性】
技术研发人员：鲍锴，周亚伟，吴泽辉，吴若昆，
申请(专利权)人：上海锴泰生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：