【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及全血样本检测领域，具体而言，涉及一种全血样本中待测物的免疫学检测方法、磁性微球及磁性微球-蛋白复合物。
技术介绍
1、磁性微球，因其独特的磁响应性和表面可修饰性，在生物医学领域尤其是体外诊断等检测中展现出巨大潜力。它们由有机高分子材料与无机磁性材料结合而成，能够在外部磁场作用下实现快速定位、导向和分离。磁性微球的表面可通过化学改性引入多种官能团，如羟基(-oh)、羧基(-cooh)、醛基(-cho)、氨基(-nh2)、硫醇基(-sh)等，这不仅增强了它们的生物相容性，还为后续的抗体或其他生物分子的偶联提供了便利，广泛应用于磁分离免疫分析等体外诊断技术中。
2、然而，在体外诊断领域，全血样本的检测是一项极具挑战性的任务。全血样本包含血液中的各种成分，如红细胞、白细胞、血小板以及血浆中的各种蛋白质和细胞因子，其复杂性远超血清或血浆样本。在利用磁性微球进行全血检测时，血细胞与磁球之间的非特异性吸附是一个难以忽视的问题。非特异性吸附是指在免疫检测中，磁球表面除了与目标抗原或抗体发生特异性识别结合之外，还可能与样本中的非目标分子发生结合，如血细胞表面的蛋白质、碎片等。这不仅导致检测信号的背景噪声增加，影响检测的特异性和灵敏度，还可能产生假阳性结果，降低检测的准确性。
3、目前市面上已存在多种用于全血检测的磁球原料，这些材料在提升检测效率、简化操作流程等方面取得了一定进展。但是，这些传统磁球材料在应对非特异性吸附问题上仍显不足，难以满足临床检测对高灵敏度、高特异性和高重复性的要求。因此，开发一种新型磁球
技术实现思路
1、本专利技术的主要目的在于提供一种全血样本中待测物的免疫学检测方法、磁性微球及磁性微球-蛋白复合物，以解决现有技术中对全血样本的检测准确性低的问题。
2、为了实现上述目的，根据本专利技术的第一个方面，提供了一种全血样本中待测物的免疫学检测方法，上述免疫学检测方法包括：a)将全血样本和免疫检测试剂进行混合、孵育，获得孵育复合物；其中，免疫检测试剂包括信号分子和/或磁性微球-蛋白复合物，磁性微球-蛋白复合物包括磁性微球和包被在磁性微球上的第一亲和蛋白，第一亲和蛋白为能够特异性结合待测物的蛋白，磁性微球表面含有甲基丙烯酸酯；b)将孵育复合物进行信号检测，通过信号强度获得待测物的量。
3、进一步地，磁性微球的粒径为(1～8)±0.9μm。
4、进一步地，磁性微球-蛋白复合物是由表面含有羧基基团的磁性微球和第一亲和蛋白偶联后得到的；优选地，磁性微球的表面基团含量为10-100μmol/g；优选地，表面基团为羧基。
5、进一步地，磁性微球和第一亲和蛋白通过交联剂偶联，形成磁性微球-蛋白复合物；优选地，交联剂为dmtmm，优选地，dmtmm与磁球的投料比为(1-4):1。
6、进一步地，磁性微球的表面封闭有多聚bsa；优选地，封闭时多聚bsa的浓度为0.3％-2％(w/v)。
7、进一步地，a)包括：将全血样本与聚乙二醇稀释液混合获得混合体系，再将混合体系与免疫检测试剂进行混合、孵育，获得孵育复合物；优选地，聚乙二醇稀释液包括第一聚乙二醇稀释液或第二聚乙二醇稀释液，全血样本包括第一全血样本或第二全血样本，对应地，a)包括a1)或a2)；a1)包括：将第一全血样本与第一聚乙二醇稀释液混合，获得第一混合体系，再将第一混合体系与免疫检测试剂进行混合、孵育，获得孵育复合物；第一混合体系中，第一全血样本的体积占比为50％-90％，第一聚乙二醇稀释液中的聚乙二醇的分子量为8000-20000da；a2)包括：将第二全血样本与第二聚乙二醇稀释液混合，获得第二混合体系，再将第二混合体系与免疫检测试剂进行混合、孵育，获得孵育复合物；第二混合体系中，第二全血样本的体积占比为5％-20％，第二聚乙二醇稀释液中的聚乙二醇的分子量为800-5000da。
8、进一步地，第一聚乙二醇稀释液中聚乙二醇的质量含量为0.05-1wt％；第二聚乙二醇稀释液中聚乙二醇的质量含量为0.1-4wt％；优选地，全血样本包括新鲜血液样本或陈旧血液样本。
9、进一步地，免疫学检测方法选自化学发光免疫分析法、酶联免疫分析法或放射免疫法中的任意一种。
10、进一步地，免疫学检测方法为化学发光免疫分析法；信号分子包括标记了发光标记物的第二亲和蛋白。
11、为了实现上述目的，根据本专利技术的第二个方面，提供了一种磁性微球，上述磁性微球表面含有甲基丙烯酸酯，优选地，磁性微球的粒径为(1～8)±0.9μm；优选地，磁性微球的粒径为(1～2)±0.9μm，优选地，磁性微球的表面基团含量为10-100μmol/g；优选地，表面基团为羧基；优选地，磁性微球的表面封闭有多聚bsa。
12、为了实现上述目的，根据本专利技术的第三个方面，提供了一种磁性微球-蛋白复合物，上述磁性微球-蛋白复合物包括上述磁性微球和包被在磁性微球上的亲和蛋白。
13、应用本专利技术的技术方案，在上述全血样本中待测物的免疫学检测方法中，利用包被有第一亲和蛋白的磁性微球-蛋白复合物对待测物进行捕获，获得孵育复合物，从而实现后续对于待测物的量的检测。上述免疫学检测方法中所用的磁性微球表面含有甲基丙烯酸酯，能够减少对全血样本中非待测物的捕获，有效减少了非特异性结合，能够保证免疫反应的特异性与高效，增强了检测信号的准确性和稳定性，为全血样本的精准检测提供了创新解决方案。
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1.一种全血样本中待测物的免疫学检测方法，其特征在于，所述免疫学检测方法包括：
2.根据权利要求1所述的免疫学检测方法，其特征在于，所述磁性微球的粒径为(1～8)±0.9μm。
3.根据权利要求1所述的免疫学检测方法，其特征在于，所述磁性微球-蛋白复合物是由表面含有羧基基团的所述磁性微球和所述第一亲和蛋白偶联后得到的；
4.根据权利要求1-3中任一项所述的免疫学检测方法，其特征在于，所述磁性微球和所述第一亲和蛋白通过交联剂偶联，形成所述磁性微球-蛋白复合物；
5.根据权利要求1-4中任一项所述的免疫学检测方法，其特征在于，所述磁性微球的表面封闭有多聚BSA；
6.根据权利要求1-5中任一项所述的免疫学检测方法，其特征在于，所述a)包括：将所述全血样本与聚乙二醇稀释液混合获得混合体系，再将所述混合体系与所述免疫检测试剂进行混合、孵育，获得所述孵育复合物；
7.根据权利要求6所述的免疫学检测方法，其特征在于，
8.根据权利要求1-7中任一项所述的免疫学检测方法，其特征在于，所述免疫学检测方法选自化学发
9.根据权利要求8所述的免疫学检测方法，其特征在于，所述免疫学检测方法为所述化学发光免疫分析法；
10.一种磁性微球，其特征在于，所述磁性微球表面含有甲基丙烯酸酯，
11.一种磁性微球-蛋白复合物，其特征在于，所述磁性微球-蛋白复合物包括权利要求10所述的磁性微球和包被在所述磁性微球上的亲和蛋白。
...【技术特征摘要】
1.一种全血样本中待测物的免疫学检测方法，其特征在于，所述免疫学检测方法包括：
2.根据权利要求1所述的免疫学检测方法，其特征在于，所述磁性微球的粒径为(1～8)±0.9μm。
3.根据权利要求1所述的免疫学检测方法，其特征在于，所述磁性微球-蛋白复合物是由表面含有羧基基团的所述磁性微球和所述第一亲和蛋白偶联后得到的；
4.根据权利要求1-3中任一项所述的免疫学检测方法，其特征在于，所述磁性微球和所述第一亲和蛋白通过交联剂偶联，形成所述磁性微球-蛋白复合物；
5.根据权利要求1-4中任一项所述的免疫学检测方法，其特征在于，所述磁性微球的表面封闭有多聚bsa；
6.根据权利要求1-5中任一项所述的免疫学检测方法，其特征在于，所...
【专利技术属性】
技术研发人员：张云，钟亮，张卓玲，闫璐璐，卢东林，
申请(专利权)人：深圳市新产业生物医学工程股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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