一种检测miRNA类标志物的电化学传感器及其应用制造技术

本发明专利技术属于电化学检测技术领域，涉及一种检测miRNA类标志物的电化学传感器及其应用，本发明专利技术构建的电化学传感器是利用MOFs和miRNA适配体的结合物作为载体提取miRNA；适配体与靶标miRNA结合达到富集靶标miRNA的目的；然后，利用磷酸盐与金属离子之间的强配位作用将未与miRNA结合的适配体从MOFs上释放下来，进而被修饰后的丝网印刷电极测定，不仅提高了提取的效率和检测特异性且试剂安全无毒、对环境友好，也简化了预处理的流程。用于制作miRNA检测试剂盒，检测成本低、灵敏度高、特异性强、检测时间短，便于构建即时检测POCT设备，实现医院和居家的早期癌症、心梗和类风湿关节炎诊断，具有重要的实际应用价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于电化学检测，涉及一种检测mirna类标志物的电化学传感器及其应用。

技术介绍

1、微小核糖核酸(microrna，mirna)是一类内源性非编码单链rna，长度大约为20个核苷酸。mirna广泛参与了调节免疫系统刺激、脂肪代谢、细胞的增殖、分化和死亡等生物学过程，它的异常调节与心肌梗死、癌症、类风湿关节炎等疾病的发病密切相关，如mir-21在乳腺癌患者的血清中异常表达，循环血液中的mir-499含量在心肌梗死发作后快速升高，mir-146a的表达水平与关节炎相关。因此，检测体液中的mirna对于疾病的诊断、监测和预后具有重大意义。然而，mirna家族内高度相似，以及在不同个体中浓度差异大，使得mirna检测仍是一个巨大的挑战，所以迫切需要开发高灵敏度、高特异性和低成本的检测方法。

2、实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time pcr，qpcr)是mirna含量检测的金标准。但由于mirna的引物序列较短，需要的溶解温度低，降低了qpcr方法的准确性。同时，qpcr仪器昂贵、单次检测成本高且检测时间长本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种检测miRNA类标志物的电化学传感器，所述电化学传感器包括富集试剂、预处理试剂和传感模块；

2.如权利要求1所述的一种检测miRNA类标志物的电化学传感器，其特征在于，荧光标记分子为德克萨斯红Texas Red(TR)、5(6)-羧基荧光素FAM、菁类荧光染料Cy3、菁类荧光染料Cy5、六氯荧光素HEX、四氯荧光素TET、5-羧基四甲基罗丹明TAMRA中的任意一种。

3.如权利要求1所述的一种检测miRNA类标志物的电化学传感器，其特征在于，所述MOFs为UiO-66-NH2、PCN-224、PCN-222、ZIF-8/67/90、MIL-53/88B/1...

【技术特征摘要】

1.一种检测mirna类标志物的电化学传感器，所述电化学传感器包括富集试剂、预处理试剂和传感模块；

2.如权利要求1所述的一种检测mirna类标志物的电化学传感器，其特征在于，荧光标记分子为德克萨斯红texas red(tr)、5(6)-羧基荧光素fam、菁类荧光染料cy3、菁类荧光染料cy5、六氯荧光素hex、四氯荧光素tet、5-羧基四甲基罗丹明tamra中的任意一种。

3.如权利要求1所述的一种检测mirna类标志物的电化学传感器，其特征在于，所述mofs为uio-66-nh2、pcn-224、pcn-222、zif-8/67/90、mil-53/88b/101中的任意一种。

4.如权利要求1所述的一种检测mirna类标志物的电化学传感器，其特征在于，所述富集试剂的制备步骤包括：将浓度为100～500nm的适配体溶液加入浓度不高于300μg/ml的mofs溶液中，静置孵育5～30min后配置获得所述富集试剂。

5.如权利要求1所述的一种检测mirna类标志物的电化学传感器，其特征在于，所述磷酸盐为三聚磷酸钠...

【专利技术属性】
技术研发人员：丁娅，王怀松，孙琦，李睿诚，章钲贤，
申请(专利权)人：中国药科大学，
类型：发明
国别省市：