一种胶原蛋白酶突变体、基因片段、重组质粒、重组表达体系及其用途，制备胶原蛋白酶突变体、胶原蛋白三肽的方法技术

本发明专利技术公开了一种胶原蛋白酶突变体、基因片段、重组质粒、重组表达体系及其用途，制备胶原蛋白酶突变体、胶原蛋白三肽的方法，属于基因工程和发酵工程领域。本发明专利技术本提供了一种在链霉菌S. lividans TK24中实现高效分泌表达的胶原蛋白酶突变体KT231。胶原蛋白酶突变体KT231可在60℃条件下高效酶解狭鳕鱼鱼皮，且具有优良的耐热性能和较高的酶活，可用于狭鳕鱼鱼皮胶原蛋白三肽的高效制备。与市售的木瓜凝乳蛋白酶复合作用，可显著提高鱼皮酶解液中胶原蛋白三肽的比例，且无苦味口感。在制备抗皱保湿、修复受损皮肤、改善骨骼和关节健康的产品与组织工程材料、伤口愈合促进剂中具有广阔的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于基因工程和发酵工程领域，具体涉及一种胶原蛋白酶突变体、基因片段、重组质粒、重组表达体系及其用途，制备胶原蛋白酶突变体、胶原蛋白三肽的方法。

技术介绍

1、胶原蛋白是动物体内含量最丰富的蛋白质，是皮肤、骨骼、肌腱、牙齿等组织的主要成分。而胶原蛋白酶是一种可特异性降解胶原蛋白的酶，作用于胶原蛋白链状结构，切割链间键，将胶原蛋白水解为低分子量的胶原蛋白肽，包括备受关注的胶原蛋白三肽。胶原蛋白三肽的典型结构为“gly-x-y”，x多为脯氨酸，y多为羟脯氨酸。胶原蛋白三肽应用广泛，已成为大健康领域的研究热点，可用于抗皱保湿、修复受损皮肤、改善骨骼和关节健康、组织工程材料、伤口愈合促进剂等等。

2、传统的胶原蛋白酶主要依赖从动物组织 (如胰脏、胃等) 提取，该方法工艺复杂、成本高，还存在潜在的疾病传播风险，限制了大规模工业化应用。为克服这些局限，近年来研究者开始探索微生物发酵法生产胶原蛋白酶。微生物发酵法原料来源广、成本低、易控制，已成为胶原蛋白酶生产的重要发展方向。该方法潜力巨大，但在实际应用中也面临挑战，如发酵酶活低及生产成本高等问题，需本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种胶原蛋白酶突变体，其特征在于：所述胶原蛋白酶突变体具有如SEQ ID NO: 3所示的氨基酸序列。

2.一种编码胶原蛋白酶突变体的基因片段，其特征在于：所述基因片段的核苷酸序列如SEQ ID NO: 4或SEQ ID NO: 6所示。

3.一种重组质粒，其特征在于：所述质粒包括权利要求2所述的基因片段。

4.一种重组表达体系，其特征在于：所述重组表达体系内含有宿主菌和权利要求3所述的重组质粒。

5.一种制备权利要求1所述胶原蛋白酶突变体的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：...

【技术特征摘要】

1.一种胶原蛋白酶突变体，其特征在于：所述胶原蛋白酶突变体具有如seq id no: 3所示的氨基酸序列。

2.一种编码胶原蛋白酶突变体的基因片段，其特征在于：所述基因片段的核苷酸序列如seq id no: 4或seq id no: 6所示。

3.一种重组质粒，其特征在于：所述质粒包括权利要求2所述的基因片段。

4.一种重组表达体系，其特征在于：所述重组表达体系内含有宿主菌和权利要求3所述的重组质粒。

5.一种制备权利要求1所述胶原蛋白酶突变体的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

6.根据权利要求5所述的方法，其特...

【专利技术属性】
技术研发人员：鲍锴，周亚伟，吴若昆，方昕，吴泽辉，
申请(专利权)人：成都恒福禧生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：