一种GLP-1或其类似物的制备方法技术

本发明专利技术属于生物制药技术领域，具体涉及一种GLP‑1或其类似物的制备方法。本发明专利技术提供了一种前导肽，以及包含所述前导肽的融合蛋白。以该前导肽或融合蛋白进行司美格鲁肽前体多肽的制备，结果显示：原核表达融合蛋白，产量可达26g/L，酶切后获得的前体多肽纯度高于95％。进一步对前体多肽进行侧链修饰以及连接二肽，高效制备获得司美格鲁肽。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物制药，具体涉及一种glp-1或其类似物的制备方法。

技术介绍

1、胰高血糖素样肽-1(glucagon-like peptide-1，glp-1)类似物作为glp-1受体激动剂，具有出色的降糖和减重效果，目前现有技术中公开了多种glp-1类似物，包括艾塞那肽、利西拉肽、贝拉鲁肽、利拉鲁肽、洛塞那肽、替尔泊肽、司美格鲁肽、阿必鲁肽、杜拉鲁肽以及度拉糖肽等等。

2、其中，司美格鲁肽与人glp-1有94％的序列同源性。相较于天然glp-1，司美格鲁肽在结构上：第8位丙氨酸被α-氨基异丁酸替代，可抵抗dpp-4降解；第26位赖氨酸通过间隔基连接c-18脂肪二酸侧链，与白蛋白紧密结合；第34位赖氨酸被精氨酸取代，防止c-18脂肪二酸结合到错误位置。因此，司美格鲁肽的半衰期被有效延长，实现每周一次注射的频率，大大减少了注射次数，提高患者依从性。司美格鲁肽代谢方式类似大分子蛋白，没有特定的代谢器官，而是在组织中广泛代谢，因此用药不受肝肾功能影响，具有较好的安全性。

3、目前，司美格鲁肽的合成方法主要有半发酵法和化学全合成两种路径本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种前导肽，其特征在于，所述的前导肽的氨基酸序列包含MADEAEKAG(SEQ ID NO：8)。

2.根据权利要求1所述的前导肽，其特征在于，所述的前导肽的C端还包含酶切位点，优选Kex2酶和/或CPB酶的酶切位点；

3.一种融合蛋白，其特征在于，所述的融合蛋白包含权利要求1或2所述的前导肽和目标肽，所述的目标肽包括GLP-1或其类似物。

4.根据权利要求3所述的融合蛋白，其特征在于，所述的GLP-1类似物包括利拉鲁肽、司美格鲁肽、阿必鲁肽或杜拉鲁肽中的一种或两种以上。

5.根据权利要求3所述的融合蛋白，其特征在于，所述的目标肽的氨基...

【技术特征摘要】

1.一种前导肽，其特征在于，所述的前导肽的氨基酸序列包含madeaekag(seq id no：8)。

2.根据权利要求1所述的前导肽，其特征在于，所述的前导肽的c端还包含酶切位点，优选kex2酶和/或cpb酶的酶切位点；

3.一种融合蛋白，其特征在于，所述的融合蛋白包含权利要求1或2所述的前导肽和目标肽，所述的目标肽包括glp-1或其类似物。

4.根据权利要求3所述的融合蛋白，其特征在于，所述的glp-1类似物包括利拉鲁肽、司美格鲁肽、阿必鲁肽或杜拉鲁肽中的一种或两种以上。

5.根据权利要求3所述的融合蛋白，其特征在于，所述的目标肽的氨基酸序列包括tftsdvssylegqaakefiawlvrgrg(seq id no：5)、haegtftsdvssylegqaakefiawlvkgrg(seqid no：9)、hgegtftsdvssylegqaakefiawlvkgr(seq id no：11)、hgegtftsdvssyleeqaakefiawlvkggg(seq id no：12)、

6.根据权利要求3-5任一所述的融合蛋白，其特征在于，所述的目标肽为一个或两个以上串联；

7.根据权利要求6所述的融合蛋白，其特征在于，目标肽与目标肽之间通过linker序列连接；

8.根据权利要求7所述的融合蛋白，其特征在于，所述linker序列的n端和c端包含酶切位点，所述的linker序列还包括dgtdeaekag(seq id no：7)；

9.根据权利要求3-8任一所述的融合蛋白，其特征在于，所述的融合蛋白包括a-bm或a-cn，其中，a为前导肽，b为目标肽，c为linker序列-bm，m或n独立的选自1-10的整数。

10.根据权利要求3-9任一所...

【专利技术属性】
技术研发人员：王曙宾，马坤，朱永真，李建，杨志茹，蒋云红，
申请(专利权)人：汉肽生物医药集团有限公司，
类型：发明
国别省市：