一种羧酸还原酶突变体及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一种羧酸还原酶突变体及其应用。所述突变体为羧酸还原酶的第394位发生定点突变，或第419位发生定点突变，或第394位和第614位同时发生定点突变。突变体G394F的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示，核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；突变体G419H的氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示，核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示；突变体MT1的氨基酸序列如SEQ ID NO.8所示，核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示。与野生型羧酸还原酶相比，本发明专利技术羧酸还原酶突变体酶活提高了1.73至1.94倍，1,5‑PDO产率提高了8.76％至32.67％，有效缩短了1,5‑PDO的生产周期，降低了1,5‑PDO的生产成本。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种羧酸还原酶突变体及其应用，属于微生物酶。

技术介绍

1、1,5-戊二醇(1,5-pdo)是有机合成中的关键二醇及中间体，近年来在不同领域获得了广泛关注和应用。是新型聚酯、涂料、粘合剂、密封剂和增塑剂等化学品生产的绿色原料。可作为防冻液、油墨、特殊洗涤剂等化学合成的环保绿色溶剂。在医药领域，用于生产青霉素中间体、抗肿瘤药物和麻醉用品。1,5-pdo与传统增塑剂相比，能够改善其耐温性差的缺点且效率高。随着多领域对1,5-pdo的需求扩大，目前生产能力达不到市场需求。因此，高效合成1,5-pdo的发展前景广阔。

2、工业上1,5-pdo的生产主要依靠石油为原料通过氧化还原反应制得。但具有工艺路线繁琐、副产物杂醇较多，需消耗大量不可再生的石油能源，使生产1,5-pdo的能力受到有限的c5原料的限制，造成大规模生产实现存在困难。而可再生碳源-生物质，不仅来源广泛易获得、原料成本低，而且可再生周期短。所以近年来生物质衍生糠醛或四氢呋喃甲醇转化为1,5-pdo的化学方法受到广泛关注。然而，这些过程通常包括多个化学步骤，包括氢化、脱水、水合作本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种羧酸还原酶突变体，其特征在于，所述突变体为羧酸还原酶的第394位甘氨酸发生定点突变，或第419位甘氨酸发生定点突变，或第394位甘氨酸和第614位异亮氨酸同时发生定点突变；所述羧酸还原酶的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，氨基酸序列如SEQ IDNO.2所示。

2.如权利要求1所述的羧酸还原酶突变体，其特征在于，所述突变体为羧酸还原酶突变体G394F，其氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示，编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；是将羧酸还原酶氨基酸序列的第394位甘氨酸突变成苯丙氨酸。

3.如权利要求1所述的羧酸还原酶突变体，其特征在于...

【技术特征摘要】

1.一种羧酸还原酶突变体，其特征在于，所述突变体为羧酸还原酶的第394位甘氨酸发生定点突变，或第419位甘氨酸发生定点突变，或第394位甘氨酸和第614位异亮氨酸同时发生定点突变；所述羧酸还原酶的核苷酸序列如seq id no.1所示，氨基酸序列如seq idno.2所示。

2.如权利要求1所述的羧酸还原酶突变体，其特征在于，所述突变体为羧酸还原酶突变体g394f，其氨基酸序列如seq id no.4所示，编码基因的核苷酸序列如seq id no.3所示；是将羧酸还原酶氨基酸序列的第394位甘氨酸突变成苯丙氨酸。

3.如权利要求1所述的羧酸还原酶突变体，其特征在于，所述突变体为羧酸还原酶突变体g419h，其氨基酸序列如seq id no.6所示，编码基因的核苷酸序列如seq id no.5所示；是将羧酸还原酶氨基酸序列的第419位甘氨酸突变成组氨酸。

4.如权利要求1所述的羧酸还原酶突变体，其特征在于，所述突变体为羧酸还原酶突变体mt1(g419h-i614r)，其氨基...

【专利技术属性】
技术研发人员：王源炜，马春玲，王瑞明，李丕武，赵晗，
申请(专利权)人：齐鲁工业大学山东省科学院，
类型：发明
国别省市：