一种用于调控CaMKII-δ亚型选择性表达的单碱基编辑系统技术方案

本发明专利技术公开一种用于调控CaMKII‑δ亚型选择性表达的单碱基编辑系统，该系统由融合碱基脱氨酶的Cas9蛋白突变体以及识别CaMKII‑δ基因序列的sgRNA。其中，sgRNA引导融合蛋白实现CaMKII‑δ中靶位点intron15的剪接供体或intron16的剪接配体的单碱基替换，有效调控靶基因CaMKII‑δRNA剪接过程，定向剪接调控后的CaMKII‑δ基因选择性表达CaMKII‑δ3亚型，同时消除CaMKII‑δ9。本发明专利技术还提供该碱基编辑系统治疗缺血性心肌病的应用，通过单碱基突变调控心脏CaMKII‑δ亚型选择性表达，高效逆转血液再灌注造成的心肌损伤，有望应用于缺血性心肌病的治疗。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物医药领域，具体涉及一种用于调控camkii-δ亚型选择性表达的单碱基编辑系统。

技术介绍

1、目前临床上对于缺血性心肌病多采用再灌注治疗，例如溶栓治疗或经皮冠状动脉介入治疗、抗心脏重塑药物治疗(如血管紧张素转化酶抑制剂(acei)、血管紧张素ii受体拮抗剂(arb))，然而，这些治疗并不能预防由于血液再灌注引起的心肌损伤。这种损伤也可能导致心脏纤维化、心肌重塑、心律失常并最终导致心力衰竭。目前临床尚无有效的治疗方案，仅能通过应用腺苷受体激动剂、镁剂、他汀类、血管紧张素受体拮抗剂等药物，做“缺血后适应”处理，但多数药物只是延迟了心肌损伤而并没有减少心肌梗死的面积，而且这些药物在临床应用上尚未广泛开展。

2、在心脏血液再灌注过程中，心脏信号和功能的中枢调节因子camkii-δ是联系上游信号(ca2+过载、ros上调)与下游事件(细胞凋亡、炎症)的重要枢纽。camkii-δ是一个单基因-多亚型的多功能丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶家族。其中，camkii-δ3和camkii-δ9是主要的心脏剪接变体。camkii-δ3是通过参与转录因子ga本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.单碱基编辑系统，所述系统由融合碱基脱氨酶的Cas9蛋白突变体以及识别CaMKII-δ基因序列的sgRNA组成，所述Cas9蛋白突变体由Cas9蛋白的RuvC1和HNH两个核酸酶活性区域中至少一个核酸酶活性区域突变而成；

2.根据权利要求1所述的单碱基编辑系统，其特征在于，所述sgRNA具有如下特征：

3.根据权利要求1所述的单碱基编辑系统，其特征在于，所述碱基脱氨酶包含腺嘌呤脱氨酶及其变体或胞嘧啶脱氨酶及其变体，具体为TadA-TadA*。

4.含有权利要求1-3任一所述的单碱基编辑系统的重组载体。

5.碱基编辑工具盒，其特征在于，所述...

【技术特征摘要】

1.单碱基编辑系统，所述系统由融合碱基脱氨酶的cas9蛋白突变体以及识别camkii-δ基因序列的sgrna组成，所述cas9蛋白突变体由cas9蛋白的ruvc1和hnh两个核酸酶活性区域中至少一个核酸酶活性区域突变而成；

2.根据权利要求1所述的单碱基编辑系统，其特征在于，所述sgrna具有如下特征：

3.根据权利要求1所述的单碱基编辑系统，其特征在于，所述碱基脱氨酶包含腺嘌呤脱氨酶及其变体或胞嘧啶脱氨酶及其变体，具体为tada-tada*。

4.含有权利要求1-3任一所述的单碱基编辑系统的重组载体。

5.碱基编辑工具盒，其特征在于，所述工具盒含有权利要求1-3任一所述的单碱...

【专利技术属性】
技术研发人员：丁杨，程皓，蔡杵欣，周建平，
申请(专利权)人：中国药科大学，
类型：发明
国别省市：