一种碱性蛋白酶突变体及其应用制造技术

技术编号:44733547 阅读:23 留言:0更新日期:2025-03-21 17:58
本发明专利技术属于生物工程技术领域,具体涉及一种通过分子改造获得的酶活力及热稳定性均提高的碱性蛋白酶突变体及其应用。本发明专利技术利用定点突变技术对ALK野生型进行突变,得到40℃下酶活力相对于野生型提高的突变体T56C/A90C,在60℃下保温4h测定蛋白酶活力及残余酶活,在高温环境下具有一定的活力,从而提高碱性蛋白酶的热稳定性,以利于在较高的碱性环境下发挥作用,因此在洗涤、皮革、医药、饲料、丝绸、食品等多个行业中具有广泛的应用。

【技术实现步骤摘要】

:本专利技术属于生物工程,具体涉及一种通过分子改造获得的酶活力及热稳定性均提高的碱性蛋白酶突变体及其应用


技术介绍

0、技术背景:

1、蛋白酶是指具有特定水解肽键的酶的总称。蛋白酶在自然界中的动物,植物和微生物中具有广泛的来源,例如动物腺体,内部器官,植物果实,茎叶,种子以及霉菌,芽胞杆菌和其他微生物。目前蛋白酶约占整个工业酶市场的60%左右,其在洗涤、食品、医药、皮革等多个行业中都有着广泛的应用。蛋白酶既能催化水解反应,也能催化其逆反应,而且具备高度的活性和专一性,非常适合医药工业对某些特定分子的生产需求。

2、按照最适ph值的不同,蛋白酶可分为碱性蛋白酶、酸性蛋白酶和中性蛋白酶。而碱性蛋白酶其与酸性和中性蛋白酶相比具有作用范围广、水解能力强等优点,是目前工业中用量较多的酶之一。碱性蛋白酶最早是在猪胰脏中被发现的,随后有研究表明,碱性蛋白酶在动植物和微生物中广泛存在。与动植物来源相比,微生物来源的碱性蛋白酶有很大一部分属于胞外分泌代谢产物,由于其具有更高的生产效率、产物提取分离简便、能够大规模发酵制备等优点,更容易满足工业化生产本文档来自技高网...

【技术保护点】

1. 一种碱性蛋白酶突变体,其特征在于,所述突变体为T56C/A90C突变体,酶原区氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示。

2.权利要求1所述碱性蛋白酶突变体的编码基因。

3. 如权利要求2所述的编码基因,其特征在于,核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示。

4.包含权利要求2所述编码基因的重组载体或重组菌株。

5.如权利要求4所述的重组载体,其特征在于,采用的表达质粒为pBSA43。

6. 如权利要求4所述的重组菌株,其特征在于,采用的宿主为枯草芽孢杆菌WB600、解淀粉芽孢杆菌CGMCC No.11218或地衣芽孢杆菌27...

【技术特征摘要】

1. 一种碱性蛋白酶突变体,其特征在于,所述突变体为t56c/a90c突变体,酶原区氨基酸序列如seq id no.5所示。

2.权利要求1所述碱性蛋白酶突变体的编码基因。

3. 如权利要求2所述的编码基因,其特征在于,核苷酸序列如seq id no.6所示。

4.包含权利要求2所述编码基因的重组载体或重组菌株。

5.如权利要求4所述的重组载体,其特征在于,采用的表达质粒为pbs...

【专利技术属性】
技术研发人员:路福平刘逸寒王丽雅李玉
申请(专利权)人:天津科技大学
类型:发明
国别省市:

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