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【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及微生物,具体涉及一种多重耐药沙门氏菌烈性噬菌体及其应用。
技术介绍
1、食源性致病菌是危害食品安全和公共健康的重要因子。沙门氏菌(salmonella)是全球细菌性食源性疾病的最常见致病菌之一,主要通过污染肉、蛋、奶、果蔬等食品传播,导致人们食物中毒,表现为腹泻、发烧、呕吐等临床症状。据统计,目前鉴定到的沙门氏菌血清型超过2600种,肠炎沙门氏菌和鼠伤寒沙门氏菌是常见的血清型。近年来,一种新的优势沙门氏菌血清型—鼠伤寒沙门氏菌单相变种(salmonella enterica serovar 4,[5],12:i:-)在国内外流行,该血清型不同于鼠伤寒沙门氏菌的主要特征是ii相鞭毛抗原不表达,目前这一优势型在食品和临床病例中的检出率急剧增加。在我国诸多地区,鼠伤寒沙门氏菌单相变种在沙门氏菌腹泻病例中占据首位,成为食品安全和公共健康的重要威胁。
2、随着抗生素的广泛使用和滥用,沙门氏菌的多重耐药性日益严重,成为全球重要的公共卫生问题之一,也为食品安全领域带来挑战。食品源和临床源的鼠伤寒沙门氏菌单相变种都呈现不同程度的耐药性,且多重耐药菌株占比高。因此,亟需寻找新的防控手段来防控多重耐药型菌株。
3、噬菌体是一种可以侵染细菌的病毒,相比抗生素,噬菌体具有分布广、特异性强、易分离、绿色环保安全等优点。在专利技术抗生素前,噬菌体已被应用于针对细菌性疾病的治疗中,但随着抗生素的出现及对噬菌体认识的局限性,有关噬菌体的研究逐渐变少。近年来,随着耐药菌的出现,噬菌体的研究被重新重视。
4、目前,
技术实现思路
1、基于
技术介绍
所述的现存噬菌体抗菌谱较窄且针对耐药菌的噬菌体缺乏的问题,本专利技术的目的是提供一种多重耐药沙门氏菌烈性噬菌体及其应用。
2、所述一种多重耐药沙门氏菌烈性噬菌体为一株广谱多重耐药沙门氏菌噬菌体vb_sal_tmvp009(salmonella enterica serovar 4,[5],12:i:-vb-sal-tmvp009,为jerseyvirus属,保藏编号cgmcc no.46177),已送至中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为cgmcc no.46177,保藏日期为2024年9月2日,可用于食品、药品、环境中耐药沙门氏菌的防控。
3、本专利技术的目的可以通过以下技术方案来实现:
4、本专利技术的技术方案之一,提供一种多重耐药沙门氏菌烈性噬菌体。
5、进一步地,所述噬菌体即一株广谱多重耐药沙门氏菌噬菌体vb-sal-tmvp009,所述噬菌体鼠伤寒沙门氏菌单相变种噬菌体于2024年9月2日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为cgmcc no.46177,保藏地址为:中国.北京市.朝阳区北辰西路1号院3号.中国科学院微生物研究所。
6、进一步地,所述噬菌体vb-sal-tmvp009头部呈六面体,直径为49.49nm、尾长122.67nm,在形态学上属于有尾病毒目;
7、进一步地,根据基因组学分析,所述噬菌体vb-sal-tmvp009属于jerseyvirus属噬菌体,全基因组长度为44327bp,g+c含量为49.77%;可编码基因总数为68,包括具有裂解功能的蛋白lysin及putative spanin protein,其中,lysin的基因序列如seq.id.no.1所示,putative spanin protein的基因序列如seq.id.no.2所示,无trna,无毒力基因,无耐药基因,具有安全性。
8、进一步地,所述噬菌体vb-sal-tmvp009可在-80℃下进行长期保藏;所述噬菌体vb-sal-tmvp009在-20℃~60℃效价稳定,在ph=3~12效价稳定,热稳定性及酸碱稳定性良好。
9、本专利技术的技术方案之二,提供一种微生物制剂,包含上述噬菌体vb-sal-tmvp009。
10、本专利技术的技术方案之三,提供上述微生物制剂的应用。
11、进一步地,所述应用中,微生物制剂作为抑菌剂、消毒剂、食品添加剂、饲料添加剂;所述抑菌剂、消毒剂、食品添加剂、饲料添加剂用于食品、药品、环境中沙门氏菌的抑制。
12、进一步地,所述沙门氏菌包括以下沙门氏菌中的任一种:鼠伤寒沙门氏菌、海德堡沙门氏菌、肠炎沙门氏菌、埃森沙门氏菌、德比沙门氏菌、阿贡那沙门氏菌、印第安纳沙门氏菌、莫斯科沙门氏菌、曼哈顿沙门氏菌或鼠伤寒沙门氏菌单相变种。
13、进一步地,所述噬菌体vb-sal-tmvp009的感染复数(moi)为0.0001~10;
14、在本专利技术的一些具体实施方式中,所述噬菌体vb-sal-tmvp009的最佳感染复数(moi)为0.0001;潜伏期为8min,裂解期为10~60min。
15、进一步地,所述抑菌剂、消毒剂需要进一步包括药学上可接受的辅料或载体;形式为片剂型、喷雾剂型、粉末剂型;
16、所述药学上可接受的辅料指用于将活性化合物/生物制剂转化为适用于给药的剂型的成分,所述药学上可接受的辅料包括粘合剂、填充剂、稳定剂和/或崩解剂中的任一种。
17、进一步地,所述抑菌剂、消毒剂中噬菌体vb-sal-tmvp009可按感染复数moi=0.0001~0.01添加。
18、进一步地,所述食品添加剂、饲料添加剂需要进一步包括食品或饲料上认可的辅料;所述食品或饲料上认可的辅料用于改善食品或饲料的风味、口感、质地、外观、营养价值;所述食品或饲料上认可的辅料包括淀粉和/或改性淀粉(常用作食品增稠剂)、纤维素和纤维素衍生物、亲水胶体、乳化剂、防结块剂、甜味剂或着色剂中的至少任一种。
19、进一步地,所述食品添加剂、饲料添加剂中噬菌体vb-sal-tmvp009可按感染复数moi=0.0001~0.01添加。
20、在本专利技术的一些具体实施方式中,所述抑菌剂为食品抑菌剂,所述食品抑菌剂中的噬菌体可用于食品基质中;所述食品基质可以为液体食品基质或固体食品基质;所述液体食品基质为奶类、果蔬汁、食用油、酒精饮料、蜂蜜中的任一种;所述固体食品基质为肉、蛋或果蔬中的任一种;
21、在本专利技术的一些优选的具体实施方式中,所述固体食品基质为生菜,所述液体食品基质为牛奶;
22、在本专利技术的一些优选的具体实施方式中,当所述食品基质为生菜时,噬菌体可有效控制生菜中沙门氏菌的浓度,最高可降低3.399log,说明该噬菌体可用于对固体食品中沙门氏菌的防控;
23、在本专利技术的一些优选的具体实施方式中,当所述食品基质为牛奶时,噬菌体可有效控制牛奶中沙门氏菌的浓度,最高可降低3.719log,说明该噬菌体可用本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种多重耐药沙门氏菌烈性噬菌体vB-Sal-TmvP009,其特征在于,所述噬菌体于2024年9月2日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCCNo.46177。
2.一种微生物制剂,其特征在于,包含如权利要求1所述的一种多重耐药沙门氏菌烈性噬菌体vB-Sal-TmvP009。
3.如权利要求2所述的一种微生物制剂的应用,其特征在于,作为抑菌剂、消毒剂、食品添加剂、饲料添加剂。
4.根据权利要求3所述的一种微生物制剂的应用,其特征在于,所述抑菌剂、消毒剂、食品添加剂、饲料添加剂用于食品、药品、环境中沙门氏菌的抑制。
5.根据权利要求4所述的一种微生物制剂的应用,其特征在于,所述沙门氏菌包括以下沙门氏菌中的任一种:鼠伤寒沙门氏菌、海德堡沙门氏菌、肠炎沙门氏菌、埃森沙门氏菌、德比沙门氏菌、阿贡那沙门氏菌、印第安纳沙门氏菌、莫斯科沙门氏菌、曼哈顿沙门氏菌或鼠伤寒沙门氏菌单相变种。
6.根据权利要求4所述的一种微生物制剂的应用,其特征在于,所述抑菌剂、消毒剂需要进一步包括药学上可接受的辅料或载体。
7.根据权利要求4所述的一种微生物制剂的应用,其特征在于,所述抑菌剂、消毒剂的形式为片剂型、喷雾剂型、粉末剂型。
8.根据权利要求4所述的一种微生物制剂的应用,其特征在于,所述抑菌剂、消毒剂中噬菌体可按MOI=0.0001~0.01添加。
9.根据权利要求4所述的一种微生物制剂的应用,其特征在于,所述食品添加剂、饲料添加剂需要进一步包括食品或饲料上认可的辅料。
10.根据权利要求4所述的一种微生物制剂的应用,其特征在于,所述食品添加剂、饲料添加剂中噬菌体可按MOI=0.0001~0.01添加。
...【技术特征摘要】
1.一种多重耐药沙门氏菌烈性噬菌体vb-sal-tmvp009,其特征在于,所述噬菌体于2024年9月2日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为cgmccno.46177。
2.一种微生物制剂,其特征在于,包含如权利要求1所述的一种多重耐药沙门氏菌烈性噬菌体vb-sal-tmvp009。
3.如权利要求2所述的一种微生物制剂的应用,其特征在于,作为抑菌剂、消毒剂、食品添加剂、饲料添加剂。
4.根据权利要求3所述的一种微生物制剂的应用,其特征在于,所述抑菌剂、消毒剂、食品添加剂、饲料添加剂用于食品、药品、环境中沙门氏菌的抑制。
5.根据权利要求4所述的一种微生物制剂的应用,其特征在于,所述沙门氏菌包括以下沙门氏菌中的任一种:鼠伤寒沙门氏菌、海德堡沙门氏菌、肠炎沙门氏菌、埃森沙门氏菌、德比沙门氏菌...
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