【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医药领域，具体涉及一种抗b7h3的纳米抗体及其在制备预防和/或治疗肿瘤的药物中的用途。
技术介绍
1、b7同源物3(b7h3)是免疫球蛋白超家族的成员，也被称为cd276，是一种ⅰ型跨膜糖蛋白，它包含两个ig样c2型(免疫球蛋白样)结构域和两个ig型v型(免疫蛋白样)的结构域。b7h3可参与调节t细胞介导的免疫反应。b7h3还通过抑制自然杀伤介导的细胞裂解在肿瘤细胞中发挥保护作用，并作为检测神经母细胞瘤细胞的标志物。此外，b7h3参与急性和慢性移植排斥反应的发展以及粘膜表面淋巴细胞活性的调节。它还可以在整个怀孕期间为胎盘和胎儿提供合适的免疫环境方面发挥关键作用。
2、b7h3在单核细胞和粒细胞及人体正常组织中均无表达，而在一些树突状细胞、t细胞、自然杀伤(nk)细胞和b细胞上有表达是近年来新发现的免疫检查点。该靶点不仅可通过抑制免疫系统促成肿瘤细胞的免疫逃逸，还可通过一些非免疫途径介导肿瘤的转移、耐药、血管生成从而促进癌症进展。研究发现，b7h3在非小细胞肺癌、胰腺癌、原发性肝癌、结直肠癌、乳腺癌、前列腺癌、咽喉癌、黑色素瘤等多种肿瘤组织中有异常大量表达，且在肿瘤微环境(tme)中的基质细胞、纤维原细胞、上皮细胞等表面也有表达，其在肿瘤组织中的过量表达往往伴随患者不良预后与较短的总生存期和无进展生存期。
3、enoblituzumab(依布妥组单抗)是一种人源化igg1κ单克隆抗体，可以识别人b7h3蛋白。但是，enoblituzumab的分子量为150kda，其分子量较大不利于穿透血脑
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种抗b7h3的纳米抗体，并提供了以该抗b7h3的纳米抗体作为活性成分的抗肿瘤药物。
2、本专利技术提供了一种核苷酸分子，它的核苷酸序列如seq id no:9所示。
3、本专利技术还提供了一种表达载体，它包含核苷酸序列如seq id no:9所示的核苷酸分子。
4、本专利技术还提供了一种宿主细胞，它包含上述的表达载体。
5、本专利技术还提供了一种纳米抗体，它包括互补决定区cdr1-cdr3，cdr1的氨基酸序列为ftfsryg，cdr2的氨基酸序列为iysdgst，cdr3的氨基酸序列为trgtggsheadsgstrwg。
6、进一步地，所述纳米抗体还包括与互补决定区cdr1-cdr3交替连接的四个框架区fr1-fr4，fr1的氨基酸序列为evqvvesggglaqpggslrlsc aasg，fr2的氨基酸序列为mgwarqvpgkglewvsg，fr3的氨基酸序列为fyarsvkgrftisrdnakntvylqmnslkpedtavyyc，fr4的氨基酸序列为rgqgtqvtvss。
7、进一步地，所述纳米抗体的氨基酸序列如seq id no:8所示。
8、本专利技术还提供了一种制备上述纳米抗体的方法，所述方法包括以下步骤：
9、(1)将核苷酸序列如seq id no:9所示的核苷酸分子连接至表达载体中获得阳性质粒；
10、(2)用阳性质粒转化宿主细胞，诱导表达纳米抗体。
11、本专利技术还提供了上述纳米抗体在制备预防和/或治疗肿瘤的药物中的用途。
12、进一步地，所述肿瘤为胃癌、胶质瘤、黑色素瘤、肾细胞癌、胰腺癌、乳腺癌、肺癌、前列腺癌、胆管癌、头颈部鳞状细胞癌或子宫颈癌。
13、进一步地，所述肿瘤为肿瘤。
14、本专利技术还提供了一种预防和/或治疗肿瘤的药物，它是以上述纳米抗体为活性成分，加上药学上可接受的辅料制备而成的制剂。
15、本领域技术人员公知的，抗b7h3抗体可以治疗的肿瘤包括：胃癌、胶质瘤、恶性黑色素瘤、肾细胞癌、胰腺癌、乳腺癌、非小细胞肺癌、前列腺癌、胆管癌、头颈部鳞状细胞癌、子宫颈癌等。
16、本专利技术取得了以下有益效果：
17、本专利技术的抗b7h3纳米抗体具有与b7h3蛋白的高亲和力，在制备预防和/或治疗肿瘤的药物中具有广阔的应用前景。
18、本专利技术的抗b7h3纳米抗体分子量约15kda，其最大程度的降低了异源性带来的免疫风险，更有利于穿透血脑屏障，更易到达肿瘤内部发挥治疗效果。
19、显然，根据本专利技术的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本专利技术上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。
20、以下通过实施例形式的具体实施方式，对本专利技术的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本专利技术上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本专利技术上述内容所实现的技术均属于本专利技术的范围。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种核苷酸分子，其特征在于，它的核苷酸序列如SEQ ID NO:9所示。
2.一种表达载体，其特征在于，它包含权利要求1所述的核苷酸分子。
3.一种宿主细胞，其特征在于，它包含权利要求2所述的表达载体。
4.一种纳米抗体，其特征在于，它包括互补决定区CDR1-CDR3，CDR1的氨基酸序列为FTFSRYG，CDR2的氨基酸序列为IYSDGST，CDR3的氨基酸序列为TRGTGGSHEADSGSTRWG。
5.根据权利要求4所述的纳米抗体，其特征在于，它还包括与互补决定区CDR1-CDR3交替连接的四个框架区FR1-FR4，FR1的氨基酸序列为EVQVVESGGGLAQPGGSLRLSCAASG，FR2的氨基酸序列为MGWARQVP GKGLEWVSG，FR3的氨基酸序列为FYARSVKGRFTISRDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAVYYC。
6.根据权利要求5所述的纳米抗体，其特征在于，它的氨基酸序列如SEQ ID NO:8所示。
7.一种制备权利要求4-6任一项所述纳米抗体的方法，其特征在于，所
8.权利要求4-6任一项所述纳米抗体在制备预防和/或治疗肿瘤的药物中的用途。
9.根据权利要求8所述的用途，其特征在于，所述肿瘤为胃癌、胶质瘤、黑色素瘤、肾细胞癌、胰腺癌、乳腺癌、肺癌、前列腺癌、胆管癌、头颈部鳞状细胞癌或子宫颈癌。
10.一种预防和/或治疗肿瘤的药物，其特征在于，它是以权利要求4-6任一项所述纳米抗体为活性成分，加上药学上可接受的辅料制备而成的制剂。
...【技术特征摘要】
1.一种核苷酸分子，其特征在于，它的核苷酸序列如seq id no:9所示。
2.一种表达载体，其特征在于，它包含权利要求1所述的核苷酸分子。
3.一种宿主细胞，其特征在于，它包含权利要求2所述的表达载体。
4.一种纳米抗体，其特征在于，它包括互补决定区cdr1-cdr3，cdr1的氨基酸序列为ftfsryg，cdr2的氨基酸序列为iysdgst，cdr3的氨基酸序列为trgtggsheadsgstrwg。
5.根据权利要求4所述的纳米抗体，其特征在于，它还包括与互补决定区cdr1-cdr3交替连接的四个框架区fr1-fr4，fr1的氨基酸序列为evqvvesggglaqpggslrlscaasg，fr2的氨基酸序列为mgwarqvp gkglewvsg，...
【专利技术属性】
技术研发人员：梁洪，余鼎，刘东，肖宇，张航，李春燕，
申请(专利权)人：成都蓉生药业有限责任公司，
类型：发明
国别省市：
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