一种增强无细胞表达蛋白的DNA元件及其在D2P中的应用制造技术

本发明专利技术提供了一种增强无细胞表达蛋白的DNA元件及其在D2P中应用，具体地，本发明专利技术通过优化3‑UTR序列，增强无细胞表达蛋白的产量，节约时间成本和资金成本，极大促进蛋白质在科研、医药、大健康、美容、食品等领域的商业应用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物，具体地，涉及一种增强无细胞表达蛋白的dna元件及其应用及其在d2p中应用。

技术介绍

1、蛋白质是一切生命的物质基础，是机体细胞的重要组成部分。蛋白质在生物、医药领域拥有重要的应用和巨大的价值，比如分子酶(taq酶、pfu酶)、抗体、激素、血红蛋白、胶原蛋白、甜蛋白等等都是蛋白质，这些蛋白质在科研、医药、大健康、美容、食品等领域具有无限的商业价值。蛋白质有如此巨大的应用和前景，如何能够以更低成本大量制备这些蛋白质是一项迫在眉睫的技术问题。传统的方法一般通过大肠杆菌、酵母细胞、昆虫细胞、哺乳动物细胞进行表达纯化。在应用医药和食品等领域，大肠杆菌面临去内毒素的问题。而酵母细胞、昆虫细胞、哺乳动物细胞生产周期相对较长、成本较高。

2、除了以上人们对于细胞内蛋白质合成的了解之外，蛋白质合成也可以在细胞外进行。蛋白质体外合成系统一般是指在细菌、真菌、植物细胞或动物细胞的裂解体系中，加入mrna或者dna模板、rna聚合酶及氨基酸和atp等组分，完成外源蛋白的快速高效翻译。

3、在体外合成蛋白的过程中，mrna的结构对蛋白表本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种核酸构建物，所述核酸构建物具有从5’至3’的式I结构：

2.如权利要求3所述的核酸构建物，其特征在于，所述“-”所示的连接序列为密码子优化的连接序列；优选地，所述连接序列具有不易形成二级结构的序列(如AT-rich序列，无发卡结构，无G-quadruplex等等)，不富含稀有密码子。

3.如权利要求1所述的核酸构建物，其特征在于，所述Z1所示的外源蛋白的编码序列来自原核生物、真核生物；优选的，所述外源蛋白的编码序列来自动物、植物、病原体；更优选的，所述外源蛋白的编码序列来自哺乳动物，较佳地灵长动物，啮齿动物，包括人、小鼠、大鼠；优选地，所述外源蛋白选自可溶...

【技术特征摘要】

1.一种核酸构建物，所述核酸构建物具有从5’至3’的式i结构：

2.如权利要求3所述的核酸构建物，其特征在于，所述“-”所示的连接序列为密码子优化的连接序列；优选地，所述连接序列具有不易形成二级结构的序列(如at-rich序列，无发卡结构，无g-quadruplex等等)，不富含稀有密码子。

3.如权利要求1所述的核酸构建物，其特征在于，所述z1所示的外源蛋白的编码序列来自原核生物、真核生物；优选的，所述外源蛋白的编码序列来自动物、植物、病原体；更优选的，所述外源蛋白的编码序列来自哺乳动物，较佳地灵长动物，啮齿动物，包括人、小鼠、大鼠；优选地，所述外源蛋白选自可溶性蛋白、功能性蛋白以及活性蛋白的天然蛋白或突变蛋白或人工设计蛋白；更优选地，所述外源蛋白选自下组之一：荧光素蛋白，或荧光素酶(如萤火虫荧光素酶)、绿色荧光蛋白、黄色荧光蛋白、氨酰trna合成酶、甘油醛-3-磷酸脱氢酶、过氧化氢酶、肌动蛋白、抗体的可变区域、荧光素酶突变、α-淀粉酶、肠道菌素a、丙型肝炎病毒e2糖蛋白、胰岛素前体、干扰素αa、白细胞介素-1β、溶菌酶素、血清白蛋白、单链抗体段(scfv)、甲状腺素运载蛋白、酪氨酸酶、木聚糖酶、或其组合。

4.如权利要求1-3任意一项所述的核酸构建物，其特征在于：所述z2所示的3’端非翻译区(3-utr)的编码序选自下组之一；

5.如权利要求1-4任意一项所述的核酸构建物，其特征在于：所述核酸构建物还包括信号肽的编码序列，所述的信号肽的的氨基酸序列选自下组之一：

6.如权利要求5所述的核酸构建物，其特征在于：所述的信号肽的编码序列选自下组之一；

7.如权利要求1-6任意一项所述的核酸构建物，其特征在于：所述核酸构建物还包括增强子元件、kozak序列、ω序列、或其...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭敏，杨隆金，胡家保，徐丽琼，于雪，
申请(专利权)人：康码上海生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：