一种寡核苷酸偶联原位监测系统及检测方法技术方案

本发明专利技术提供了一种寡核苷酸偶联原位监测系统及检测方法，监测系统中沿光束方向依次设置有红光LED、物镜、光阑、双胶合透镜、偏振片、第一柱面透镜、柱面棱镜、流通池芯片、第二柱面透镜、第一成像透镜、第二成像透镜和CMOS相机，入射光路与反射光路成角度设置，流通池芯片通过耦合液与柱面棱镜进行折射率匹配，通过分析CMOS相机采集反射光斑，实时获取检测区域对应光谱共振角变化，进而表征检测区域的偶联物变化，所述监测系统利用表面等离子共振效应灵敏地分析敏感膜层表面的物质结合情况，实现寡核苷酸偶联过程的原位表征以及多通道、阵列化的实时检测。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及合成生物学，尤其是一种寡核苷酸偶联原位监测系统及检测方法。

技术介绍

1、dna合成是合成生物学的关键使能技术之一，dna合成设备实现自主创新是促进生命科学与医疗技术进步的重要因素。偶联效率是一种衡量dna合成设备是否能将新碱基准确加至dna链的方法，其对合成产率与链长是至关重要的，合成长链时即使偶联效率只降低1％，其带来的损失也是巨大的。因此，准确地检测偶联效率有助于对dna合成设备、试剂以及工艺等具体技术细节做出进一步调整，以提高合成终产量。

2、现阶段，偶联效率检测一般采用离线式光学检测方法。其中最常用、最具代表性的是在标准寡核苷酸合成中的dmt吸光度检测法。然而，吸光度检测的检测限较高，较低的样品浓度或/和寡核苷酸表面覆盖率都难以保证检测准确度。此外，也可采用荧光末端标记法，但目前其应用场景仍局限于对合成工艺的探究性实验，染料标记的引入对于实际合成来说是复杂且高成本的。尽管第二代固相芯片式合成已发展了十几年，也仍然缺乏能将偶联效率的原位在线检测集成于dna合成仪的方案。

3、表面等离子共振传感是一类能激发快速衰本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种寡核苷酸偶联原位监测系统，其特征在于：其光路系统中沿光束方向依次设置有红光LED(1)、物镜(2)、光阑(3)、双胶合透镜(4)、偏振片(5)、第一柱面透镜(6)、柱面棱镜(7)、流通池芯片(8)、第二柱面透镜(9)、第一成像透镜(10)、第二成像透镜(11)和CMOS相机(12)，入射光路与反射光路成角度设置，所述流通池芯片(8)包括基底玻璃(101)、粘合层(102)、敏感膜层(103)、盖板(104)和液路接口(105)，所述流通池芯片(8)包括基底玻璃(101)、粘合层(102)、敏感膜层(103)、盖板(104)和液路接口(105)，所述基底玻璃(101)与盖板(104...

【技术特征摘要】

1.一种寡核苷酸偶联原位监测系统，其特征在于：其光路系统中沿光束方向依次设置有红光led(1)、物镜(2)、光阑(3)、双胶合透镜(4)、偏振片(5)、第一柱面透镜(6)、柱面棱镜(7)、流通池芯片(8)、第二柱面透镜(9)、第一成像透镜(10)、第二成像透镜(11)和cmos相机(12)，入射光路与反射光路成角度设置，所述流通池芯片(8)包括基底玻璃(101)、粘合层(102)、敏感膜层(103)、盖板(104)和液路接口(105)，所述流通池芯片(8)包括基底玻璃(101)、粘合层(102)、敏感膜层(103)、盖板(104)和液路接口(105)，所述基底玻璃(101)与盖板(104)固定连接并形成空腔作为流通池，所述粘合层(102)和敏感膜层(103)置于该空腔内，所述基底玻璃(101)上固定有粘合层(102)，所述粘合层(102)上固定有敏感膜层(103)，所述盖板(104)上设有液路接口(105)；其中，所述流通池芯片(8)位于柱面棱镜(7)上方，二者之间有用于填充折射率匹配液的空隙，cmos相机(12)与计算机连接。

2.根据权利要求1所述的寡核苷酸偶联原位监测系统，其特征在于：所述入射光路与反射光路夹角为120°，光束经所述第一柱面透镜(6)聚焦后的聚焦角度为15°-20°，入射角为50°-70°，所述偏振片(5)的偏振方向为p偏振。

3.根据权利要求1所述的寡核苷酸偶联原位监测系统，其特征在于：所述柱面棱镜(7)的材质为高折射率重火石玻璃sf11或蓝宝石玻璃。

4.根据权利要求1所述的寡核苷酸偶联原位监测系统，其特征在于：所述流通池芯片(8)是由下述方法制备得到的：

5.根据权利要求4所述的寡核苷酸偶联原位监测系统，其特征在于：所述基底玻璃(101)材质为高折射率重火石玻璃sf1 1或蓝宝石玻璃...

【专利技术属性】
技术研发人员：栗大超，周逸，李小平，
申请(专利权)人：天津大学，
类型：发明
国别省市：