肿瘤相关抗原的合成型核酸构建体设计以及工程T细胞制备制造技术

本发明专利技术涉及免疫治疗领域，具体地，涉及一种包含编码特异性结合肿瘤相关抗原的合成型T细胞抗原受体(STAR)的核苷酸序列的核酸构建体，以及由所述核酸构建体制备的工程T细胞。本申请还涉及所述核酸构建体和所述工程T细胞在肿瘤治疗中的用途。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及免疫治疗领域，具体地，涉及一种包含编码特异性结合肿瘤相关抗原的合成型t细胞抗原受体(star)的核苷酸序列的核酸构建体，以及由所述核酸构建体制备的工程t细胞。本申请还涉及所述核酸构建体和所述工程t细胞在药物开发，肿瘤和自身免疫性疾病等治疗中的用途。

技术介绍

1、细胞免疫治疗，如嵌合抗原受体t细胞(chimeric antigen receptor t-cell,car-t)免疫疗法在近十年间彻底改变了癌症的治疗格局，许多已无药可治的血液瘤患者在接受了car-t细胞疗法后，肿瘤受到了显著的控制，部分患者甚至完全康复，在多种癌症的治疗中表现出巨大的应用前景。

2、细胞免疫治疗中，如car-t细胞的成功制备是免疫治疗应用最关键的一步，目前自体或异体car-t细胞的临床前和临床制备在很大程度上依赖于使用病毒载体(如逆转录病毒、慢病毒)将识别肿瘤特异性抗原的car转基因转导进t细胞。然而，通过病毒转导递送到t细胞的car转基因会随机整合到宿主dna中，可能会引起t细胞的快速增殖或者转录沉默等现象，带来难以预见的风险和可变的转基因表达。此外本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种核酸构建体，其包含编码特异性结合肿瘤相关抗原的合成型T细胞抗原受体(STAR)的核苷酸序列，以及在所述STAR的核苷酸序列两侧的第一引导序列和第二引导序列；其中，所述第一引导序列和第二引导序列包含能够被Cas12a蛋白识别的PAM序列和能够与所述Cas12a蛋白结合的crRNA序列。

2.权利要求1所述的核酸构建体，其中，所述第一引导序列和第二引导序列中的PAM序列位于靠近所述STAR的一端；

3.权利要求1或2所述的核酸构建体，其中，所述核酸构建体在STAR和第一引导序列之间还包含第一同源臂序列，并且所述核酸构建体在STAR和第二引导序列之间还包含第二同...

【技术特征摘要】

1.一种核酸构建体，其包含编码特异性结合肿瘤相关抗原的合成型t细胞抗原受体(star)的核苷酸序列，以及在所述star的核苷酸序列两侧的第一引导序列和第二引导序列；其中，所述第一引导序列和第二引导序列包含能够被cas12a蛋白识别的pam序列和能够与所述cas12a蛋白结合的crrna序列。

2.权利要求1所述的核酸构建体，其中，所述第一引导序列和第二引导序列中的pam序列位于靠近所述star的一端；

3.权利要求1或2所述的核酸构建体，其中，所述核酸构建体在star和第一引导序列之间还包含第一同源臂序列，并且所述核酸构建体在star和第二引导序列之间还包含第二同源臂序列；

4.权利要求3所述的核酸构建体，其中，所述靶序列包含与所述crrna序列互补的序列；

5.权利要求1-4任一项所述的核酸构建体，其中，所述核酸构建体还包含编码调节元件的核苷酸序列；

6.权利要求1-5任一项所述的核酸构建体，其中，所述核酸构建体包含：第二引导序列，第二同源臂，star，第一同源臂，第一引导序列；

7.权利要求1-6任一项所述核酸构建体，其中，所述核酸构建体包含：第二引导序列，第二同源臂，启动子，star，自剪切多肽，第一同源臂，第一引导序列；

8.权利要求1-7任一项所述的核酸构建体，其中，所述cas12a蛋白选自天然的cas12a蛋白，cas12a蛋白的突变体，cas12a蛋白的同源物，或其任意组合。

9.权利要求1-8任一项所述的核酸构建体，其中，所述肿瘤相关抗原选自：cd19、egfr、cd20、cd16、cd64、cd78、cd96、cll1、cd116、cd117、cd71、cd45、cd71、cd123、cd138、erbb2(her2/neu)、癌胚抗原(cea)、上皮细胞粘附分子(epcam)、间皮素msln、表皮生长因子受体(egfr)、egfr变体iii(egfrviii)、cd19、cd20、cd30、cd40、双唾液酸神经节苷脂gd2、导管上皮粘蛋白、gp36、tag-72、鞘糖脂、神经胶质瘤相关的抗原、β-人绒毛膜促性腺激素、α胎儿球蛋白(afp)、外源凝集素反应性afp、甲状腺球蛋白、rage-1、mn-ca ix、人端粒酶逆转录酶、ru1、ru2(as)、肠羧基酯酶、mut hsp70-2、m-csf、前列腺酶(prostase)、前列腺酶特异性抗原(psa)、pap、ny-eso-1、laga-1a、p53、prostein、psma、存活和端粒酶、前列腺癌肿瘤抗原-1(pcta-1)、mage、elf2m、嗜中性粒细胞弹性蛋白酶、肝配蛋白b2、cd22、胰岛素生长因子(igf1)-i、igf-ii、igfi受体、呈递肿瘤特异性肽表位的主要组织相容性复合体(mhc)分子、5t4、ror1、nkp30、nkg2d、肿瘤基质抗原、纤维连接蛋白的额外结构域a(eda)和额外结构域b(edb)、腱生蛋白-c的a1结构域(tnc a1)、成纤维细胞相关蛋白(fap)...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘宏涛，王惠敏，王嘉盛，林欣，
申请(专利权)人：北京昌平实验室，
类型：发明
国别省市：