使神经细胞分化的方法及相关组合物和使用方法技术

本公开提供了使多能干细胞，包括诱导多能干细胞，谱系特异性分化成中脑底板祖细胞、定向多巴胺(DA)神经元祖细胞和/或DA神经元的方法。还提供了其组合物用途，诸如用于治疗神经退行性疾病和病状，包括帕金森病的组合物用途。

【技术实现步骤摘要】

本公开涉及使多能干细胞，包括诱导多能干细胞，谱系特异性分化成中脑底板祖细胞、定向多巴胺(da)神经元祖细胞和/或多巴胺(da)神经元的方法。还提供了分化细胞的组合物及其治疗用途，诸如用于治疗神经退行性病状和疾病，包括帕金森病(parkinson’sdisease)的治疗用途。

技术介绍

1、考虑到使多能干细胞分化成谱系特异性细胞群的各种方法和所得的细胞组合物可用于患有导致定向细胞群功能损失的疾病的患者的细胞替代疗法。然而，在一些情况下，此类方法在产生具有一致生理特征的细胞的能力方面受到限制，并且由此类方法产生的细胞可能在体内移植和使其它细胞受神经支配的能力方面受到限制。需要改进的方法及其细胞组合物，包括提供用于使细胞分化，诸如以产生生理一致的细胞的改进方法。

技术实现思路

1、本文提供了一种使神经细胞分化的方法，该方法包括：(a)进行第一次温育，包括在非贴壁培养器皿中在产生细胞球体的条件下培养多能干细胞，其中在所述第一次温育开始时(第0天)，将所述细胞暴露于(i)tgf-β/激活nodal信号传导抑制剂；(i本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种使神经细胞分化的方法，所述方法包括：

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述第二次温育开始于第7天。

3.根据权利要求1或权利要求2所述的方法，其中将所述细胞：

4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其中在使所述细胞神经分化的条件下培养所述细胞包括将所述细胞暴露于(i)脑源性神经营养因子(BDNF)；(ii)抗坏血酸；(iii)胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)；

5.根据权利要求1所述的方法，其中：所述进行第二次温育开始于第7天，并且包括在涂覆有选自层粘连蛋白、胶原、巢蛋白、硫酸肝素蛋白聚糖及其组合的底物的培养器皿中培养所述...

【技术特征摘要】

1.一种使神经细胞分化的方法，所述方法包括：

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述第二次温育开始于第7天。

3.根据权利要求1或权利要求2所述的方法，其中将所述细胞：

4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其中在使所述细胞神经分化的条件下培养所述细胞包括将所述细胞暴露于(i)脑源性神经营养因子(bdnf)；(ii)抗坏血酸；(iii)胶质细胞源性神经营养因子(gdnf)；

5.根据权利要求1所述的方法，其中：所述进行第二次温育开始于第7天，并且包括在涂覆有选自层粘连蛋白、胶原、巢蛋白、硫酸肝素蛋白聚糖及其组合的底物的培养器皿中培养所述细胞，其中从第7天开始，将所述细胞暴露于(i)bmp信号传导抑制剂和(ii)gsk3β信号传导抑制剂；并且从第11天开始，将所述细胞暴露于(i)脑源性神经营养因子(bdnf)；(ii)抗坏血酸；(iii)胶质细胞源性神经营养因子(gdnf)；(iv)二丁酰环amp(dbcamp)；(v)转化生长因子β-3(tgfβ3)(统称为“bagct”)；和(vi)notch信号传导抑制剂。

6.根据权利要求1-5中任一项所述的方法，其还包括收获神经分化细胞，任选地，其中所述收获在约第16天或之后进行，其中所述收获在约第16天至约第30天之间进行，其中所述收获在第18天至第25天之间进行，和/或其中所述收获在第18天或约在第18天或约在第25天进行。

7.根据权利要求1-6中任一项所述的方法，其中所述神经分化细胞是定向多巴胺能神经元祖细胞，任选地其中所述多巴胺能神经元祖细胞在移植到受试者后能够使宿主组织受神经支配。

8.根据权利要求1-7中任一项所述的方法，其中，在进行所述第二次温育之前，将所述球体解离以产生细胞悬浮液，并且将所述细胞悬浮液的细胞在所述底物涂覆的...

【专利技术属性】
技术研发人员：A·布拉特莱尔，J·洛林，H·特伦，R·威廉姆斯，J·莫斯曼，
申请(专利权)人：艾斯本神经科学公司，
类型：发明
国别省市：