一种重组菌株NT1003△ycjQ-LS01及其构建方法与在产1,5戊二醇上的应用技术

本发明专利技术公开了一种重组菌株NT1003△ycjQ‑LS01及其构建方法与在产1,5戊二醇上的应用。筛选合成1,5戊二醇路径上的关键酶，并将赖氨酸脱羧酶CadA，转氨酶PatA，胺氧化酶ECAO，醛还原酶YahK这四种酶组成新的路径，最后将携带有这四种酶的质粒导入敲除醇降解基因ycjQ的菌株NT1003上，得到高产1,5戊二醇的菌株NT1003△ycjQ‑LS01。重组菌株NT1003△ycjQ‑LS01以Lys为底物时，合成路径减少辅因子（只需2个NADPH）和简化了生产路径（生产路径仅4步），避免了引入过多的基因引起的代谢负担；此外该菌株敲除了醇降解基因ycjQ，能够大大减少戊二醇的降解。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物工程，具体涉及一种重组菌株nt1003△ycjq-ls01及其构建方法与在产1,5戊二醇上的应用。

技术介绍

1、1,5-戊二醇是一种五碳脂肪族二醇，碳链长度及末端具有的两个羟基，赋予其成为高分子聚合物单体的潜力。它是合成聚酯、不饱和聚酯和聚氨酯的重要原料，也可用于生产塑料、化妆品和食品等。目前1,5-戊二醇的市场规模正在逐步增大，全球1,5-戊二醇市场预计将从2023年的3.2亿元增长到2030年的3.7亿元。国内市场近几年变化较快，全球产能约3000吨/年，而单就国内1,5-pdo的市场需求量已经达到2000吨/年，售价在3万元/吨左右。随着工业和消费品市场的扩展，其市场空间将会进一步扩大。

2、目前，1,5-pdo主要通过戊二酸酯或其二酯的氢化还原来生产。此外，国外也有公司利用生物质原料通过糠醛法合成1,5-戊二醇。但是，这些合成方法存在原料受限、生产过程复杂和成本高等问题。而以葡萄糖为原料从头合成1,5-戊二醇不仅避免了化学合成方法存在的问题，也更加符合绿色发展趋势。

3、由于缺乏天然的生物合成1,5-pd本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种重组菌株NT1003△ycjQ-LS01，其特征在于，以赖氨酸高产菌株NT1003为出发菌株，敲除醇脱氢酶基因ycjQ，并以重组质粒pCDFTrc(△lacO)-cadA-yahK和重组质粒pTrc99a(K)-patA-ecaO形式过表达赖氨酸脱羧酶CadA、转氨酶PatA、胺氧化酶ECAO、醛还原酶YahK的重组菌株。

2.基于权利要求1所述的重组菌株NT1003△ycjQ-LS01的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

3.根据权利要求2所述的构建方法，其特征在于，步骤1中所述PCR扩增条件为：95℃预变性5min后95℃ 15s，55℃ 15s，7...

【技术特征摘要】

1.一种重组菌株nt1003△ycjq-ls01，其特征在于，以赖氨酸高产菌株nt1003为出发菌株，敲除醇脱氢酶基因ycjq，并以重组质粒pcdftrc(△laco)-cada-yahk和重组质粒ptrc99a(k)-pata-ecao形式过表达赖氨酸脱羧酶cada、转氨酶pata、胺氧化酶ecao、醛还原酶yahk的重组菌株。

2.基于权利要求1所述的重组菌株nt1003△ycjq-ls01的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：<...

【专利技术属性】
技术研发人员：王昕，李盛基，陈可泉，华文峰，王静，陈静雯，吴韩童，
申请(专利权)人：南京工业大学，
类型：发明
国别省市：