一种基于LC-MS/MS的相思子毒素活性的检测方法技术

本发明专利技术涉及毒素检测技术领域。本发明专利技术提供了一种基于LC‑MS/MS的相思子毒素活性的检测方法，包括将待测样本与反应体系A混合反应，利用LC‑MS/MS进行检测，根据脱落腺嘌呤峰面积对样本定性，若待测样本为阳性样本，将(阳性样本脱落的腺嘌呤峰面积与内标阿昔洛韦相应的峰面积比值):(阴性样本脱落的腺嘌呤峰面积与内标阿昔洛韦相应的峰面积比值)代入标准曲线得相思子毒素浓度。本发明专利技术在检测反应脱落腺嘌呤峰面积进行样本定性的基础上，进一步通过LC‑MS/MS建立的标准曲线测定相思子毒素浓度，达到检测毒素的目的，该方案反应时间较短，在复杂基质样品的分析中更具优势，检测效果更好，灵敏度更高、特异性更强。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及毒素检测，尤其涉及一种基于lc-ms/ms的相思子毒素活性的检测方法。

技术介绍

1、相思子毒素(abrin toxin，at)是一种来源于豆科藤本植物相思子的植物毒素，分子量约为60-65kda，等电点在6-8之间，是由一条具有n-糖苷酶活性a链和一条具有半乳糖特异性的b链组成，它们通过二硫键连接在一起，b链介导a链进入细胞，a链发挥n-糖苷酶活性，特异性的切割核糖体28rrna第4324的位点上的腺嘌呤，导致蛋白质失活，从而发挥毒性作用。at分为a、b、c、d四个亚型，其中a亚型的细胞毒性最强且含量最高。at可通过不同的感染途径进入人体引起中毒，包括呼吸道、消化道、肌肉注射等。目前有许多特定的检测方法来检测这种有毒植物蛋白，但很少基于毒素活性的检测。因此探究得到一种可以实现快速、准确的检测at活性的方法具有重要意义，这对于识别生物活性毒素也至关重要。

技术实现思路

1、本专利技术的目的在于提供一种基于lc-ms/ms的相思子毒素活性的检测方法，通过检测反应脱落腺嘌呤峰面积来进行样本定性的基础本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种基于LC-MS/MS的相思子毒素活性的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述LC-MS/MS的液相色谱条件为：色谱柱为Waters-C18反相柱，内径×长度为2.1mm×150mm，粒径为3.5μm；流动相为10mM甲酸铵，pH＝4；有机相为100％甲醇；流速为0.2mL/min；进样量为2μL。

3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述LC-MS/MS的MRM模式参数为：腺嘌呤m/z 136→m/z 92，m/z 136→m/z 119；阿昔洛韦m/z 226.1→m/z 134.9，m/z22...

【技术特征摘要】

1.一种基于lc-ms/ms的相思子毒素活性的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述lc-ms/ms的液相色谱条件为：色谱柱为waters-c18反相柱，内径×长度为2.1mm×150mm，粒径为3.5μm；流动相为10mm甲酸铵，ph＝4；有机相为100％甲醇；流速为0.2ml/min；进样量为2μl。

3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述lc-ms/ms的mrm模式参数为：腺嘌呤m/z 136→m/z 92，m/z 136→m/z 119；阿昔洛韦m/z 226.1→m/z 134.9，m/z226.1→m/z152.05。

4.根据权利要求1所述的检测...

【专利技术属性】
技术研发人员：辛文文，李佳欣，康琳，董理娜，柳婷婷，高姗，王菁，王景林，
申请(专利权)人：中国人民解放军军事科学院军事医学研究院，
类型：发明
国别省市：