一种高效固定酶的方法及其应用于D-阿洛酮糖的制备技术

本发明专利技术公开了一种高效固定酶的方法及其应用于D‑阿洛酮糖的制备，属于酶工程领域。本发明专利技术提供的方法为将D‑阿洛酮糖‑3‑差向异构酶与制备的次氮基三乙酸修饰的磁性纳米颗粒混合孵育得到固定化D‑阿洛酮糖‑3‑差向异构酶。本发明专利技术提供的高效固定化D‑阿洛酮糖‑3‑差向异构酶不仅能提高D‑阿洛酮糖‑3‑差向异构酶热稳定性，而且容易从酶解体系中分离出来，实现了D‑阿洛酮糖‑3‑差向异构酶的重复利用，降低了生产成本。将所述固定化D‑阿洛酮糖‑3‑差向异构酶应用于D‑阿洛酮糖的制备中，大大降低了酶制剂的原料成本，具有较高的工业化应用价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种高效固定酶的方法及其应用于d-阿洛酮糖的制备，属于酶工程领域。

技术介绍

1、d-阿洛酮糖是d-果糖的c-3差向异构体，在小麦中以游离糖的形式存在。d-阿洛酮糖除具有低能量、改善肠道菌群、抗龋齿等生理功能外，还在抑制血糖升高与体脂积累、清除自由基、神经保护等诸多方面发挥着重要生理作用。d-阿洛酮糖甜度可达到蔗糖的70％，能量只有蔗糖的10％，是一种新型甜味剂，尤其适用于糖尿病及肥胖症人群，它可被小肠吸收，通过尿液排出体外。2011年，d-阿洛酮糖被美国fda认定为公认安全(gras)的食品，允许其添加到食品中。自此d-阿洛酮糖得到了迅速发展，市场上出现了多种含d-阿洛酮糖的产品，它们作为特殊人群(如糖尿病患者、肥胖人群)的功能性食品在市场中受到广泛欢迎。

2、d-阿洛酮糖的合成主要有两种方法：化学合成法和生物转化法。d-阿洛酮糖的化学合成比较困难，以钼酸盐为催化剂，反应温度维持在80-120℃，该过程副产物较多，同时化学合成法还存在环境污染严重、立体选择性低等问题。因此d-阿洛酮糖的合成主要依赖于生物转化法。生物转化法主要是运本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种固定化载体的制备方法，其特征在于，所述方法为在Fe3O4纳米颗粒的表面覆盖一层沸石咪唑骨架的外壳，然后利用3-氨丙基三乙氧基硅烷与戊二醛引入醛基，最后利用Nα,Nα-双(羧甲基)-L-赖氨酸引入NTA，最终合成一种NTA功能化的磁性纳米颗粒，即固定化载体。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，包括如下步骤：

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述Fe3O4的粒径为200nm，所述聚苯乙烯磺酸钠溶液的浓度为0.3-0.5％w/v；所述Fe3O4与聚苯乙烯磺酸钠溶液的添加比例为(3：2)-(2：1)(w/v)，Fe3O4、甲醇、Zn...

【技术特征摘要】

1.一种固定化载体的制备方法，其特征在于，所述方法为在fe3o4纳米颗粒的表面覆盖一层沸石咪唑骨架的外壳，然后利用3-氨丙基三乙氧基硅烷与戊二醛引入醛基，最后利用nα,nα-双(羧甲基)-l-赖氨酸引入nta，最终合成一种nta功能化的磁性纳米颗粒，即固定化载体。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，包括如下步骤：

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述fe3o4的粒径为200nm，所述聚苯乙烯磺酸钠溶液的浓度为0.3-0.5％w/v；所述fe3o4与聚苯乙烯磺酸钠溶液的添加比例为(3：2)-(2：1)(w/v)，fe3o4、甲醇、zn(no3)2和2-甲基咪唑的添加比例为(1：1：5：14)-(2：1：5：14)(w/v/w/w)；

4.利用权利1～3任一项所述的方法制备的固定化载体。

5.一种高效固定化酶的制备方法，其特征在于，所述方法为将带有组氨酸标签的酶与权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：金征宇，王晨，龙杰，李兴飞，周星，陈龙，邱超，赵建伟，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：