可双重检测大丽轮枝菌和尖孢镰刀菌的试剂盒和方法技术

本发明专利技术属于生物检测领域，具体涉及一种可双重检测大丽轮枝菌和尖孢镰刀菌的试剂盒和方法。本发明专利技术发现了针对大丽轮枝菌和尖孢镰刀菌的最佳引物对，并基于该引物对建立了RPA单重和双重检测方法，且适用于RPA‑LFD检测。与目前检测枯黄萎病常用的技术相比，本发明专利技术能够在保证高特异性和低检测限的同时，更加灵敏、快速、便捷地检测出棉花相关样品中的大丽轮枝菌和尖孢镰刀菌，且有利于摆脱对专业技术人员和实验室精密仪器的依赖，对于棉花黄萎病菌和枯萎病菌的快速准确鉴定、监测和早期防治具有重要意义。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物检测领域，具体涉及一种可双重检测大丽轮枝菌和尖孢镰刀菌的试剂盒和方法。

技术介绍

1、棉花（gossypium spp.）是世界上主要的经济作物之一，其纤维是重要的纺织原料。然而，棉花的生产受到多种病害的影响。棉花黄萎病和棉花枯萎病是棉花上一种重要的检疫性土传真菌病害。病原菌主要通过维管束来侵染棉株，也可以通过带菌种子、病株残体和带菌土壤等形式传播扩散，随着棉种繁殖、调运，在各产棉区辗转传播。尤其是目前没有高效可行的防治棉花黄萎病的办法，因此，该病被称为棉花上的“癌症”。通过早发现早防治，削弱棉花黄萎病和枯萎病在田间的扩散和侵染，以此保证棉花的高产稳产，对棉花产业发展具有重大意义。

2、目前植物病原真菌的检测方法多种多样，对于该病原真菌的检测方法主要有分离培养、血清学技术、聚合酶链式反应（polymerase chain reaction，pcr）、实时荧光定量pcr、巢式pcr、微流控芯片pcr技术、环介导等温技术（loop mediated isothermalamplification，lamp）等，上述技术虽能够检测出本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种试剂盒，其含有用于检测大丽轮枝菌（Verticillium dahliae）的第一检测体系和用于检测尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum）的第二检测体系中的至少一个检测体系；

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其中，所述第一检测体系和第二检测体系中分别包括探针；

3.根据权利要求2所述的试剂盒，其中，所述下游引物的5'端修饰有荧光标记基团或生物素亲和基团。

4.根据权利要求2或3所述的试剂盒，其中，所述荧光标记基团选自FAM、FITC、TAMRA、荧光素、罗丹明、Alexa Fluor 系列染料、GFP、HEX、TET、Cyanine...

【技术特征摘要】

1.一种试剂盒，其含有用于检测大丽轮枝菌（verticillium dahliae）的第一检测体系和用于检测尖孢镰刀菌（fusarium oxysporum）的第二检测体系中的至少一个检测体系；

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其中，所述第一检测体系和第二检测体系中分别包括探针；

3.根据权利要求2所述的试剂盒，其中，所述下游引物的5'端修饰有荧光标记基团或生物素亲和基团。

4.根据权利要求2或3所述的试剂盒，其中，所述荧光标记基团选自fam、fitc、tamra、荧光素、罗丹明、alexa fluor 系列染料、gfp、hex、tet、cyanine dye、rox、texas red中的任一种；

5.根据权利要求1所述的试剂盒，其中，所述试剂盒还含有rpa扩增...

【专利技术属性】
技术研发人员：蔡璐璐，暴晓阳，赵文军，马云龙，张瑞平，刘记，孟青青，潘磊，田茜，
申请(专利权)人：三亚中国检科院生物安全中心，
类型：发明
国别省市：