一种莱茵衣藻NPHP4蛋白的兔多克隆抗体及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种莱茵衣藻NPHP4蛋白的兔多克隆抗体及其制备方法和应用，NPHP4蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。制备方法：莱茵衣藻NPHP4蛋白抗原表位的分析与设计，选取859‑1058aa氨基酸片段构建原核细胞重组表达载体；将重组表达载体转入原核表达细胞中，获得重组表达菌株，诱导抗原蛋白表达；将纯化后的抗原蛋白作为免疫原，进行兔子免疫，获得NPHP4蛋白兔多克隆抗血清，并进一步纯化处理；纯化后的多克隆抗体可通过IF方法进行莱茵衣藻纤毛过渡区的标记验证，证明其可以用来进行纤毛过渡区特异性荧光标记；也可通过免疫印迹WB方法对莱茵衣藻NPHP4蛋白进行定性与定量分析。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物，具体涉及一种莱茵衣藻nphp4蛋白的兔多克隆抗体及其制备方法和应用。

技术介绍

1、莱茵衣藻(chlamydomonas reinhardtii)是实验室研究中最常用的模式生物。这种单细胞真核绿藻，因其培养条件简单、生长周期短、生长速度快、光合效率高而被称为“光合酵母”。迄今为止，已经实现了对莱茵衣藻核基因组、叶绿体基因组和线粒体基因组的遗传转化。

2、纤毛是高度保守的细胞器，在细胞生物学中具有多种功能。纤毛复杂的超微结构与其多种作用一起进化，包括运动和传感功能。尽管功能多样，但仍存在一个普遍保留的结构核心，包括基于微管的轴丝，具有九轴对称性。轴丝的结构和对称性由其发出的母中心粒或基体决定。在基体正确锚定到质膜后，发育中的纤毛必须建立选择性屏障来隔离对其构造至关重要的分子，因为它缺乏自主的翻译机制。这个区域连接了基体和新生纤毛，被称为过渡区(transition zone，tz)。自20世纪50年代首次通过电子显微镜(em)观察到tz以来，人们已经积累了大量知识来阐明这一关键纤毛区的结构和组成。值得注意的是，由于tz蛋白质突本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种莱茵衣藻NPHP4蛋白的兔多克隆抗体，其特征在于，所述多克隆抗体能够特异性识别莱茵衣藻纤毛过渡区的NPHP4蛋白；所述NPHP4蛋白的氨基酸序列如序列表SEQ IDNO.1所示。

2.一种如权利要求1所述的莱茵衣藻NPHP4蛋白的兔多克隆抗体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

3.根据权利要求2所述的一种莱茵衣藻NPHP4蛋白的兔多克隆抗体的制备方法，其特征在于，免疫处理方法为：将NPHP4抗原多肽与等体积的完全弗氏佐剂混合，得到第一混合液并注射至免疫兔子体内；28天后，将NPHP4抗原多肽与等体积的不完全弗氏佐剂混合，得到第二混合液并注射至所述免疫兔...

【技术特征摘要】

1.一种莱茵衣藻nphp4蛋白的兔多克隆抗体，其特征在于，所述多克隆抗体能够特异性识别莱茵衣藻纤毛过渡区的nphp4蛋白；所述nphp4蛋白的氨基酸序列如序列表seq idno.1所示。

2.一种如权利要求1所述的莱茵衣藻nphp4蛋白的兔多克隆抗体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

3.根据权利要求2所述的一种莱茵衣藻nphp4蛋白的兔多克隆抗体的制备方法，其特征在于，免疫处理方法为：将nphp4抗原多肽与等体积的完全弗氏佐剂混合，得到第一混合液并注射至免疫兔子体内；28天后，将nphp4抗原多肽与等体积的不完全弗氏佐剂混合，得到第二混合液并注射至所述免疫兔子体内；7天后，将nphp4抗原多肽与等体积的不完全弗氏佐剂混合，得到第三混合液并注射至所述免疫兔子体内；7天后，将nphp4抗原多肽与等体积的不完全...

【专利技术属性】
技术研发人员：王亮，徐闯，蒋林，李亚，王苏慧，钱蕴瑶，吴怡琼，董周舟，苗宸羽，
申请(专利权)人：江苏师范大学，
类型：发明
国别省市：