一种细胞色素P450BM3突变体及其在合成2-羟基-1,8-桉叶油素中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种细胞色素P450BM<subgt;3</subgt;突变体及其在高选择性氧化1,8‑桉叶油素生成2‑羟基‑1,8‑桉叶油素中的应用，所述突变体是将SEQ ID No.1所示氨基酸序列第171位、第87位、第307位、第437位这四个位点中至少有一个氨基酸进行置换；第171位组氨酸His突变为亮氨酸Leu，第87位苯丙氨酸Phe突变为丙氨酸Ala，第307位谷氨酰胺Gln突变为组氨酸His，第437位亮氨酸Leu突变为缬氨酸Val；通过对细胞色素P450BM<subgt;3</subgt;的活性位点进行突变，最终获得了具有高选择性氧化1,8‑桉叶油素生成2‑羟基‑1,8‑桉叶油素的P450BM<subgt;3</subgt;突变体。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及酶工程和基因工程，特别涉及一种细胞色素p450bm3突变体及其在合成2-羟基-1,8-桉叶油素中的应用。

技术介绍

1、1,8-桉叶油素(1,8-cineole)是一类是双环单萜化合物,1,8-桉叶油素具有一种樟脑和草药的特殊香味，常作为香精香料使用。此外1,8-桉叶油素被证明可以参与调节nrf2信号通路等药理活性，可被用于疥螨、消化系统、呼吸系统和神经退行性疾病等多种疾病的治疗，广泛应用于药品、食品和化妆品领域。2-羟基-1,8-桉叶油素作为1,8-桉叶油素的主要代谢产物，可以发展成为一种具有潜在应用价值的增值化学品，用于解决1,8-桉叶油素生产过程中产生的环境污染、自然资源浪费等问题。

2、一种可行策略为将已消耗的生物质能或废物通过微生物发酵方法转化为生产工业相关的原材料或增值化合物，从而达到还原再生、再利用的生产目的。例如，以提取精油的桉树叶为基质接种平菇等菌类，可以将1,8-桉叶油素转化为两种新的芳香化合物，2-羟基-1,8-桉叶油素和2-羰基-1,8-桉叶油素。尽管这种废物利用的策略展现了一定的应用前景，但产物的混杂性以本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种细胞色素P450BM3突变体，其特征在于，所述突变体是将SEQ ID No.1所示氨基酸序列第171位、第87位、第307位、第437位这四个位点中至少有一个氨基酸进行置换；第171位组氨酸His突变为亮氨酸Leu，第87位苯丙氨酸Phe突变为丙氨酸Ala，第307位谷氨酰胺Gln突变为组氨酸His，第437位亮氨酸Leu突变为缬氨酸Val。

2.根据权利要求1所述细胞色素P450BM3突变体，其特征在于，所述突变体包括所述突变体包括H171L、H171L/F87A、H171L/F87A/Q307H或H171L/F87A/Q307H/L437V。</p>

3.一种...

【技术特征摘要】

1.一种细胞色素p450bm3突变体，其特征在于，所述突变体是将seq id no.1所示氨基酸序列第171位、第87位、第307位、第437位这四个位点中至少有一个氨基酸进行置换；第171位组氨酸his突变为亮氨酸leu，第87位苯丙氨酸phe突变为丙氨酸ala，第307位谷氨酰胺gln突变为组氨酸his，第437位亮氨酸leu突变为缬氨酸val。

2.根据权利要求1所述细胞色素p450bm3突变体，其特征在于，所述突变体包括所述突变体包括h171l、h171l/f87a、h171l/f87a/q307h或h171l/f87a/q307h/l437v。

3.一种编码权利要求1～2任一项所述细胞色素p450bm3突变体蛋白的基因。

4.一种含有权利要求3所述基因的重组质粒。

5.根据...

【专利技术属性】
技术研发人员：任鑫坤，潘文进，范鑫龙，王子妍，辛思蕊，蒋宛彤，李志恒，
申请(专利权)人：南京大学，
类型：发明
国别省市：