一种外泌体及其制备方法与应用技术

本发明专利技术涉及细胞生物学领域，具体公开了一种外泌体及其制备方法与应用。本发明专利技术制备外泌体的方法包括：（1）将编码信号肽TPA和表皮生长因子的核苷酸序列导入宿主细胞的AAVS1区域中如SEQ ID No.9与SEQ ID No.10所示序列之间，获得改造后的宿主细胞；（2）收集所述改造后的宿主细胞分泌的外泌体。本发明专利技术可显著提升外泌体中的EGF mRNA表达水平，从而使获得的外泌体在皮肤创伤治疗中获得更好的效果。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及细胞生物学，具体地说，涉及一种外泌体及其制备方法与应用。

技术介绍

1、皮肤损伤由机械性、物理性、化学性和生物性等因素引起，机体对损伤进行修补的过程叫做组织修复。组织修复可分为三个阶段：第一阶段为局部炎症反应阶段，伤口被血凝块填充，继而发生炎症反应，该阶段主要作用是止血和封闭创口，减少感染。第二阶段为细胞的增殖分化及肉芽组织的生成阶段，真皮中的血管借助基质和生长因子形成新的血管芽并向伤口内延伸，形成新的血管网络。血管形成的过程中，成纤维细胞快速增生，结合细胞基质共同形成肉芽组织填充伤口。伤口愈合后就进入到第三阶段：伤口重塑期。在该阶段，各种参与修复的组织、基质、胶原蛋白、血管等重新磨合使得进一步接近正常皮肤组织。胶原蛋白也由之前无序的排列逐渐转变为规则的排列方式，使得皮肤能够承受外部的张力和压力。

2、人表皮生长因子（human epidermal growth factor，hegf）是由53个氨基酸组成的单链小分子酸性多肽，具有多种生物学功能，具有明显的促细胞增殖、分化和迁移的功能，从而在器官发育及伤口修复中扮演重要角色。he本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种制备外泌体的方法，其特征在于，包括：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，编码表皮生长因子的核苷酸序列如SEQ IDNo.1所示；编码信号肽TPA的核苷酸序列如SEQ ID No.11。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述宿主细胞为293F细胞。

4.根据权利要求1-3任一项所述的方法，其特征在于，通过将携带编码信号肽TPA和表皮生长因子的核苷酸序列的载体和携带sgRNA的载体同时转入宿主细胞中，获得改造后的宿主细胞。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述sgRNA的核苷酸序列如SEQ ID No.8...

【技术特征摘要】

1.一种制备外泌体的方法，其特征在于，包括：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，编码表皮生长因子的核苷酸序列如seq idno.1所示；编码信号肽tpa的核苷酸序列如seq id no.11。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述宿主细胞为293f细胞。

4.根据权利要求1-3任一项所述的方法，其特征在于，通过将携带编码信号肽tpa和表皮生长因子的核苷酸序列的载体和携带sgrna的载体同时转入宿主细胞中，获得改造后的宿主细胞。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述sgrna的核苷酸序列如seq id no.8所示。

6.根据...

【专利技术属性】
技术研发人员：高珮芬，安文林，申久恒，赵宪，武雪，汪旭东，周晚彤，
申请(专利权)人：国药中生生物技术研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：