【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物医药领域，更具体的，涉及一种修饰细胞内源性cd7基因的方法、由该方法制备得到的内源性cd7基因修饰的细胞及其应用。
技术介绍
1、免疫疗法已经成为包括恶性肿瘤在内的多种疾病的有效治疗方法。免疫疗法能够通过靶向疾病靶点发挥作用，从而特异、有效的实现治疗目的。但是，在向受试者施用靶向与疾病或病症相关的抗原的免疫疗法(例如car-t细胞疗法)时，该免疫疗法不仅可以耗尽意图靶向的病理性细胞，还存在耗尽可以表达靶向抗原的非病理性细胞的风险。一些car-t细胞疗法(例如针对靶点cd19或cd33的疗法)已报道了这种情况。这无疑会成为向患者使用免疫疗法时的消极因素。因为如果靶向抗原表达在受试者生存所需的正常细胞表面上，或者表达在若消耗则会明显损害受试者身体健康的细胞表面上，则受试者可能无法接受该免疫疗法，或需要承受一旦施用这种疗法则可能出现的严重的副作用。另一种情况下，当需要施用的免疫疗法所使用的免疫效应细胞上也表达同样的抗原时，例如靶抗原也表达在car-t细胞的细胞表面上时，就可能导致免疫效应细胞的自相残杀，并使得相应细胞疗法无法...
【技术保护点】
1.一种修饰细胞内源性CD7基因的方法，其特征在于，所述方法包括：
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述CD7抗原的表达在所述经基因修饰的细胞中减少至少50％、减少至少60％、减少至少70％、减少至少80％、减少至少90％或减少至少95％。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，其中所述细胞为免疫效应细胞；优选的，所述免疫效应细胞可以选自T细胞、B细胞、NK细胞、巨噬细胞、树突状细胞、由诱导性多能干细胞(iPSC)分化而成的免疫效应细胞或它们的任何组合。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法还包括在将所述...
【技术特征摘要】
1.一种修饰细胞内源性cd7基因的方法，其特征在于，所述方法包括：
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述cd7抗原的表达在所述经基因修饰的细胞中减少至少50％、减少至少60％、减少至少70％、减少至少80％、减少至少90％或减少至少95％。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，其中所述细胞为免疫效应细胞；优选的，所述免疫效应细胞可以选自t细胞、b细胞、nk细胞、巨噬细胞、树突状细胞、由诱导性多能干细胞(ipsc)分化而成的免疫效应细胞或它们的任何组合。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法还包括在将所述试剂引入待基因修饰的细胞之前进行配制试剂的步骤，所述步骤包括：将crrna和tracrrna混合以形成grna复合物，以及将grna复合物与cas9蛋白混合，从而得到所述试剂。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法还包括在将所述试剂引入待基因修饰的细胞之前将包含表达能够特异性识别抗原的靶向配体的核酸分子的载体转导进入细胞的步骤；或在将所述试剂引入待基因修饰的细胞之后将包含表达能够特异性识别抗原的靶向配体的核酸分子的载体转导进入细胞的步骤；优选的，其中所述能够特异性识别抗原的靶向配体可以选自嵌合抗原受体(car)、t细胞抗原受体(tcr)或b细胞抗原受体(bcr)；或优选的，其中所述载体可以选自慢病毒载体、逆转录病毒载体、腺病毒载体或腺相关病毒载体。
6.一种靶向细胞内源性cd7基因的grna，其特征在于，所述grna包含间隔序列，所述间隔序列为如seq id no:1、seq id no:2、seq id no:3、seq id no:4、seq id no:5、seq idno:6、seq id no:7、seq id no:8、seq id no:9、seq id no:10、seq id no:11、seq id no:12、seq id no:13、seq id no:14、seq id no:15、seq id no:16、seq id no:17或seq idno:18任一所示的核酸序列。
7.一种用于制备内源性cd7基因修饰的细胞的试剂，其特征在于，所述试剂包含：(i)靶向细胞内源性cd7基因的grna或用于表达所述grna的表达载体，其中所述grna包含间隔序列，所述间隔序列为如seq...
【专利技术属性】
技术研发人员：周丹，何雨辰，孙海，汪远进，刘沄沄，兰静宇，
申请(专利权)人：成都优赛诺生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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