一种DC-CIK共同培养方法技术

本发明专利技术公开一种DC‑CIK共同培养方法，包括步骤：S1、采集肿瘤患者血液，采用Ficoll分离法分离出肿瘤患者血液中的PBMC细胞；S2、利用培养液重悬分离后的细胞，然后转移到T75瓶中，置于二氧化碳培养箱培养；S3、二氧化碳培养箱培养2.5至3.5小时，将上清倒入新的T175瓶内，并加入CIK因子1培养CIK细胞，T75瓶内加入DC启动因子培养DC细胞；S4、继续培养20至26小时，T175瓶内加入CIK因子2；S5、继续培养110至130小时，T75瓶内添加DC成熟因子；S6、继续培养160至170小时DC细胞成熟收获，将DC细胞与CIK细胞一起转入至培养袋中培养；S7、再培养330至340小时收获，测试DCCIK流式表型。本发明专利技术解决了现有DC‑CIK细胞其纯度低，细胞杀伤功能差，对于肿瘤杀伤周期长的问题。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于细胞培养，具体来说，涉及一种dc-cik共同培养方法。

技术介绍

1、dc细胞是机体功能最强的专职抗原递呈细胞，它能高效地摄取、加工处理和递呈抗原；cik细胞是具有t淋巴细胞强大的抗瘤活性和nk细胞的非mhc限制性杀瘤优点。

2、dc细胞与cik细胞共培养后，提高了细胞的增殖速度和杀伤活性，且使其对肿瘤细胞的杀伤作用更具特异性。现有的dc-cik细胞其纯度不高，细胞杀伤功能不够强大，对于肿瘤杀伤周期长。

技术实现思路

1、针对现有dc-cik细胞其纯度低，细胞杀伤功能差，对于肿瘤杀伤周期长的问题，本专利技术提供了一种dc-cik共同培养方法。

2、为实现上述技术目的，本专利技术采用的技术方案如下：

3、一种dc-cik共同培养方法，包括步骤：

4、s1、采集肿瘤患者血液，采用ficoll分离法分离出肿瘤患者血液中的pbmc细胞；

5、s2、利用培养液重悬分离后的细胞，然后转移到t75瓶中，置于二氧化碳培养箱培养；p>

6、s3、本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种DC-CIK共同培养方法，其特征在于，包括步骤：

2.根据权利要求1所述的一种DC-CIK共同培养方法，其特征在于，步骤S3中二氧化碳培养箱培养最优时间为3小时。

3.根据权利要求2所述的一种DC-CIK共同培养方法，其特征在于，步骤S4中T175瓶内加入CIK因子2前继续培养时间最优为24小时。

4.根据权利要求3所述的一种DC-CIK共同培养方法，其特征在于，步骤S5中T75瓶内添加DC成熟因子前继续培养时间最优为120小时。

5.根据权利要求4所述的一种DC-CIK共同培养方法，其特征在于，步骤S6中DC细胞培养至成熟收获需培...

【技术特征摘要】

1.一种dc-cik共同培养方法，其特征在于，包括步骤：

2.根据权利要求1所述的一种dc-cik共同培养方法，其特征在于，步骤s3中二氧化碳培养箱培养最优时间为3小时。

3.根据权利要求2所述的一种dc-cik共同培养方法，其特征在于，步骤s4中t175瓶内加入cik因子2前继续培养时间最优为24小时。

4.根据权利要求3所述的一种dc-cik共同培养方法，其特征在于，步骤s5中t75瓶内添加dc成熟因子前继续培养时间最优为120小时。

5.根据权利要求4所述的一种dc-cik共同培养方法，其特征在于，步骤s6中dc细胞培养至...

【专利技术属性】
技术研发人员：廖钰婷，祝和成，李嘉卫，何恒，张明，
申请(专利权)人：华研深圳再生医学集团有限公司，
类型：发明
国别省市：