一种固定化D-阿洛酮糖-3-差向异构酶及其制备方法及应用技术

本发明专利技术提供一种固定化D‑阿洛酮糖‑3‑差向异构酶的制备方法，首先将无机硅纳米花氨基化，随后用交联剂戊二醛活化，最后加入酶液在摇床中反应一段时间后，将反应物离心并洗涤，产物即为固定化D‑阿洛酮糖‑3‑差向异构酶。该固定化酶的酶学活性和稳定性均有明显提升，其比酶活为446.44‑1033.09U/g<subgt;蛋白</subgt;，在30℃或pH＝5条件下孵育6h后固定化酶的活性是游离酶的163.09％与181.53％，重复使用10次后仍保留初始活性的63.18‑70.78％，储存15天后仍保留初始活性的46.27‑54.38％。该固定化酶可催化果糖生成阿洛酮糖，为阿洛酮糖的生产提供了一种绿色、高效的制备技术。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于固定化酶制备，具体涉及一种新型固定化d-阿洛酮糖-3-差向异构酶及其制备方法及应用。

技术介绍

1、随着肥胖、糖尿病、“三高”等慢性病在全球范围内漫延。饮食中糖分的“健康摄取”成为新的健康课题，其中，低热量甜味剂的开发和应用是最为有效的途径之一。

2、d-阿洛酮糖是一种稀有糖，兼具低热量(0.4kcal/g)与高甜度(蔗糖相对甜度的70％)的特点，在抑制肥胖、降血糖等方面具有潜在，在食品、医药、保健品等领域具有极大的应用潜力，但在自然界含量稀少，由d-阿洛酮糖-3-差-向异构酶催化d-果糖c-3位置发生差向异构反应生成d-阿洛酮糖的生物催化法逐渐受到人们的关注。d-阿洛酮糖-3-差向异构酶可催化d-果糖和d-阿洛酮糖之间的相互转化，在反应过程中无需添加其他物质，反应后副产物少，有利于降低生产成本，使后续d-阿洛酮糖的分离更加方便。

3、但d-阿洛酮糖3-异构酶催化果糖转化为阿洛酮糖过程中，由于酶无法重复利用，使得该工艺成本较高，且反应结束后，d-阿洛酮-3-异构酶本身作为杂蛋白，需要从反应体系中除去，增加了分离成本，因本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种固定化D-阿洛酮糖-3-差向异构酶，其特征在于，以D-阿洛酮糖-3-差向异构酶为酶蛋白，以无机硅纳米花为固定化载体；所述固定化D-阿洛酮糖-3-差向异构酶的形貌呈球形，直径为340nm±15nm，该球形具有孔隙，孔隙中固定有所述的D-阿洛酮糖-3-差向异构酶。

2.根据权利要求1所述的固定化D-阿洛酮糖-3-差向异构酶，其特征在于：所述固定化D-阿洛酮糖-3-差向异构酶的比酶活为446.44-1033.09U/g蛋白；

3.根据权利要求1所述的固定化D-阿洛酮糖-3-差向异构酶，其特征在于：所述固定化D-阿洛酮糖-3-差向异构酶，重复使用10次后仍保留初始...

【技术特征摘要】

1.一种固定化d-阿洛酮糖-3-差向异构酶，其特征在于，以d-阿洛酮糖-3-差向异构酶为酶蛋白，以无机硅纳米花为固定化载体；所述固定化d-阿洛酮糖-3-差向异构酶的形貌呈球形，直径为340nm±15nm，该球形具有孔隙，孔隙中固定有所述的d-阿洛酮糖-3-差向异构酶。

2.根据权利要求1所述的固定化d-阿洛酮糖-3-差向异构酶，其特征在于：所述固定化d-阿洛酮糖-3-差向异构酶的比酶活为446.44-1033.09u/g蛋白；

3.根据权利要求1所述的固定化d-阿洛酮糖-3-差向异构酶，其特征在于：所述固定化d-阿洛酮糖-3-差向异构酶，重复使用10次后仍保留初始活性的63.18-70.78％，储存15天后仍保留初始活性的46.27-54.38％。

4.根据权利要求1-3任一所述的固定化脂肪酶的制备方法，其特征在于，以d-阿洛酮糖-3-差向异构酶为酶蛋白，以无机硅纳米花为固定化...

【专利技术属性】
技术研发人员：张弛，刘冠华，姚俏，贺莹，邱茂胜，姜艳军，郑晓冰，马丽，
申请(专利权)人：河北工业大学，
类型：发明
国别省市：