一种可固态发酵的高产棘白菌素B的基因工程菌株及其构建方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种可固态发酵的高产棘白菌素B的基因工程菌株及其构建方法和应用，属于基因工程菌技术领域，所述工程菌株以厚冠突曲霉菌为底盘菌，使用强启动子gpdA作为ecdJ的启动子，构建ecdJ高表达的工程菌株，从而提高棘白菌素B发酵产量；进一步对构建的工程菌株使用固体发酵的方式进行发酵，在节约成本的同时进一步提高了棘白菌素B的产量。本发明专利技术通过构建的工程菌株强化了棘白菌素B合成途径，再结合固体发酵方式，显著提高了厚冠突曲霉菌中棘白菌素B产量并实现固体发酵，具有潜在的工业应用价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于基因工程菌，具体涉及一种高产棘白菌素b的基因工程菌株构建方法和应用。

技术介绍

1、棘白菌素b（ecb）是由曲霉属菌株产生的天然次生代谢物，是临床广泛应用的抗真菌药物阿尼芬净的半合成前体。然而，目前棘白菌素b只能通过微生物次级代谢产生，无法通过化学合成获得，这导致其生产周期长、过程复杂且产量较低。因此，提高棘白菌素b产量或降低其生产成本成为一个亟待解决的问题。

2、厚冠突曲霉菌 aspergillus pachycristatus nrrl 11440是目前用于工业生产棘白菌素b的菌株。目前，提高棘白菌素b发酵产量的策略包括非定向诱变获得高产菌株或发酵条件优化。尽管诱变育种可以获得高产菌株，但由于其过程的随机性和不确定性导致筛选工作量巨大且效率低下。因此，通过基因定向改造来对生产菌株进行遗传编辑，构建工程菌株，已成为一种更优的合成生物学技术。此外，发酵条件优化也是一种广泛使用的提高棘白菌素b产量的策略。棘白菌素b在液体发酵产生时存在发酵液粘度高、供氧不足以及成本较高等问题，难以取得突破性进展。相比之下，本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种可固态发酵的高产棘白菌素B的基因工程菌株，其特征在于，所述基因工程菌株以具备产棘白菌素基因簇的菌株为底盘菌，在底盘菌中高表达ecdJ所得，所述ecdJ基因序列如SEQ ID NO.1所示。

2.根据权利要求1所述的可固态发酵的高产棘白菌素B的基因工程菌株，其特征在于，所述ecdJ基因的序列为JX421684.1（70014-72170），所述ecdJ基因使用强启动子gpdA作为启动子。

3.根据权利要求1所述的可固态发酵的高产棘白菌素B的基因工程菌株，其特征在于，所述具备产生棘白菌素基因簇的菌株包括厚冠突曲霉菌。

4.根据权利要求3所述的可固态...

【技术特征摘要】

1.一种可固态发酵的高产棘白菌素b的基因工程菌株，其特征在于，所述基因工程菌株以具备产棘白菌素基因簇的菌株为底盘菌，在底盘菌中高表达ecdj所得，所述ecdj基因序列如seq id no.1所示。

2.根据权利要求1所述的可固态发酵的高产棘白菌素b的基因工程菌株，其特征在于，所述ecdj基因的序列为jx421684.1（70014-72170），所述ecdj基因使用强启动子gpda作为启动子。

3.根据权利要求1所述的可固态发酵的高产棘白菌素b的基因工程菌株，其特征在于，所述具备产生棘白菌素基因簇的菌株包括厚冠突曲霉菌。

4.根据权利要求3所述的可固态发酵的高产棘白菌素b的基因工程菌株，其特征在于，所述厚冠突曲霉菌为aspergillus pachycristatus nrrl 11440。

【专利技术属性】
技术研发人员：陆玲，蒋凯丽，王欣欣，罗攀，宋萍，
申请(专利权)人：南京师范大学，
类型：发明
国别省市：

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