近红外光驱动DNA纳米系统及其在检测miRNA-103中的应用技术方案

本发明专利技术公开了一种近红外光驱动DNA纳米系统及其在检测miRNA‑103中的应用，涉及细胞内miRNA原位成像的探针设计技术领域。近红外光驱动DNA纳米系统由纳米发夹探针LT‑H1和H2组成，LT‑H1的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，并且在核苷酸序列自5’端起的第43位点修饰了荧光基团Cy3，第48位点和49位点之间设有光裂解连接键；所述H2的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，并且在核苷酸序列的5’端修饰了荧光基团Cy5。上述近红外光驱动DNA纳米系统对miRNA‑103具有非常高的灵敏度和特异性，可以用于非细胞环境中miRNA‑103的监测，以及卵巢颗粒细胞miRNA‑103的原位可视化成像，还可以精准的区分不同miRNA‑103表达水平的正常人、肥胖型和非肥胖型多囊卵巢综合症患者的卵巢颗粒细胞。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及细胞内mirna原位成像的探针设计，特别涉及近红外光驱动dna纳米系统及其在检测mirna-103中的应用。

技术介绍

1、多囊卵巢综合征是一种临床上高度异质性的疾病，由育龄妇女复杂的内分泌和代谢异常引起。多囊卵巢综合征患者通常表现出复杂的表型，包括月经不调、胰岛素抵抗、卵泡发育异常、雄激素水平升高，甚至不孕。多囊卵巢综合征还与肥胖、动脉高血压和血脂异常有关，这增加了多囊卵巢综合征患者终身患2型糖尿病和心血管疾病的风险。mirna-103作为多囊卵巢综合征的潜在生物标志物，通过参与各种代谢和激素过程来调节多囊卵巢综合征的发生和发展。因此，对mirna-103在细胞中，尤其是在卵巢颗粒细胞中的空间分布和表达水平进行直观表征，将有助于阐明mirna-103在多囊卵巢综合征中的生物分子功能，并为多囊卵巢综合征患者提供有效的诊断和治疗方案。

2、动态自组装dna纳米结构具有高可编程性、结构响应性和良好的生物相容性的优点；在开发用于活细胞成像的高时空分辨率，智能响应mirna分子纳米发夹探针方面具有广阔的应用前景。目前，已开发出多种用于活细本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种近红外光驱动DNA纳米系统的构建方法，其特征在于，所述近红外光驱动DNA纳米系统用于检测miRNA-103，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的近红外光驱动DNA纳米系统的构建方法，其特征在于，还包括步骤：制备油相上转换纳米颗粒，将所述油相上转换纳米颗粒与盐酸室温搅拌处理，清洗后得到水相上转换纳米颗粒；将所述水相上转换纳米颗粒和多聚赖氨酸在水中混合，室温搅拌，清洗后得到多聚赖氨酸包覆的上转换纳米颗粒；

3.根据权利要求2所述的近红外光驱动DNA纳米系统的构建方法，其特征在于，多聚赖氨酸包覆的上转换纳米颗粒、纳米发夹探针LT-H1和H2的摩尔比为1:(4...

【技术特征摘要】

1.一种近红外光驱动dna纳米系统的构建方法，其特征在于，所述近红外光驱动dna纳米系统用于检测mirna-103，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的近红外光驱动dna纳米系统的构建方法，其特征在于，还包括步骤：制备油相上转换纳米颗粒，将所述油相上转换纳米颗粒与盐酸室温搅拌处理，清洗后得到水相上转换纳米颗粒；将所述水相上转换纳米颗粒和多聚赖氨酸在水中混合，室温搅拌，清洗后得到多聚赖氨酸包覆的上转换纳米颗粒；

3.根据权利要求2所述的近红外光驱动dna纳米系统的构建方法，其特征在于，多聚赖氨酸包覆的上转换纳米颗粒、纳米发夹探针lt-h1和h2的摩尔比为1:(40-60):(40-60)。

4.根据权利要求3所述的近红外光驱动dna纳米系统的构建方法，其特征在于，多聚赖氨酸包覆的上转换纳米颗粒、纳米发夹探针lt-h1和h2的摩尔比为1:50:50。

5.根据权利要求2所述的近红外光驱动dna纳米系统的构建方法，其特征在于，所述缓冲液的配方为：20 mm tris-hcl、150 mm nacl、5 mm mgcl2，ph 7.4。

6.根据权利要求2所述的近红外光驱动dna纳米系统的构建方法，其特征在于，制备油相上转换纳米颗粒na...

【专利技术属性】
技术研发人员：袁荃，杨雁冰，程迪，
申请(专利权)人：武汉大学，
类型：发明
国别省市：