一种高敏多聚酶标二抗及其制备方法技术

本发明专利技术属于医学检验技术领域，特别是涉及一种多聚酶标二抗制备及其应用。本发明专利技术在于酶经二乙烯基砜(DVS)活化后，与超支化氨基化聚乙二醇聚合获得多聚体酶，多聚体酶再次活化后与二抗孵育，得到多聚酶标记的二抗抗体。该方法克服目前市场上的二抗抗体主要缺陷，提高抗体上酶标的密度，使单位体积内标联到二抗上的酶分子数目大大增加；缩小多聚体酶的体积；提高酶标二抗的细胞穿透性，具有更高的灵敏度和稳定性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于医学检测，特别是涉及一种高敏多聚酶标二抗及其制备方法。

技术介绍

1、二抗是能和抗体结合，即抗体的抗体，其主要作用是检测抗体的存在，放大一抗的信号。它与抗原特异性一抗结合，可检测目标蛋白中的高度特异性氨基酸序列。二抗对一抗的指定区域或区域的特异性允许多个二抗与单一一抗结合，放大信号并增加检测敏感性。目前，二抗已广泛应用于免疫沉淀（immunoprecipitation, ip），蛋白印迹（western blot,wb），免疫组化（immunohistochemistry, ihc），免疫荧光（immunofluorescence, if）或者流式细胞术（flow cytometry, fcm），酶联免疫吸附（enzyme linked immunosorbentassay, elisa）等实验，可见二抗在免疫学实验的重要。

2、目前，市场上基于“酶标二抗复合物”的免疫分析检测系统主要有“抗体-酶直接标记法”、“利用生物素-亲合素放大法”和“链式高分子-酶-抗体多聚物”这三种方式，具体为：

3、抗体-酶直接标记法（如图本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种高敏多聚酶标二抗制备方法，其特征在于，所述多聚酶二抗包括超支化聚合物骨架、标记酶和二抗抗体均通过偶联剂连接。

2.所述的超支化聚合物骨架为超支化氨基化聚乙二醇，分子量为29080g/mol，标记酶通过偶联剂连接在聚合物骨架的支链端部和中部分支结构上。所述的标记酶通过偶联剂连接二抗抗体。

3.根据权利要求1所述的多聚酶标二抗，其特征在于，所述标记酶为辣根过氧化物酶和/或碱性磷酸酶和/或尿素酶。

4.根据权利要求1所述的多聚酶标二抗，其特征在于，二抗抗体为完整抗体或相应抗体的Fab'或(Fab)2片段，包括鼠抗羊免疫球蛋白、兔抗羊免疫球蛋白、羊抗鼠...

【技术特征摘要】

1.一种高敏多聚酶标二抗制备方法，其特征在于，所述多聚酶二抗包括超支化聚合物骨架、标记酶和二抗抗体均通过偶联剂连接。

2.所述的超支化聚合物骨架为超支化氨基化聚乙二醇，分子量为29080g/mol，标记酶通过偶联剂连接在聚合物骨架的支链端部和中部分支结构上。所述的标记酶通过偶联剂连接二抗抗体。

3.根据权利要求1所述的多聚酶标二抗，其特征在于，所述标记酶为辣根过氧化物酶和/或碱性磷酸酶和/或尿素酶。

4.根据权利要求1所述的多聚酶标二抗，其特征在于，二抗抗体为完整抗体或相应抗体的fab'或(fab)2片段，包括鼠抗羊免疫...

【专利技术属性】
技术研发人员：王森，
申请(专利权)人：重庆精准医疗产业技术研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：