无创产前检测东南亚缺失（--SEA）型α-地中海贫血的引物探针组合物、试剂盒、方法及其应用技术

本申请涉及无创产前检测东南亚缺失(‑‑SEA)型α‑地中海贫血的引物探针组合物、试剂盒、方法及其应用。本申请首次开创了一种基于微液滴数字化gap‑PCR(dd gap‑PCR)进行‑‑<supgt;SEA</supgt;型α‑地中海贫血无创产前诊断的策略，操作步骤简单、灵敏度高、特异性强、稳定性良好；在低成本的基础上，仅需1‑2mL血浆即可对所有可能有‑‑<supgt;SEA</supgt;型α‑地中海贫血妊娠风险的家系进行无创产前诊断，安全有效，既克服了侵入性穿刺的有创伤害的缺点，也减轻了孕妇的生理性疼痛及经济负担。且重复试验表明，本申请的检测策略稳定性好，灵敏度高，特异性强，有望用于α‑地中海贫血及其他单基因遗传性疾病的无创产前诊断。

【技术实现步骤摘要】

本申请涉及生物，具体涉及无创产前检测东南亚缺失(--sea)型α-地中海贫血的引物探针组合物、试剂盒、方法及其应用。

技术介绍

1、α-地中海贫血是由位于16号染色体的末端16p13.3位点上的人α-珠蛋白基因(hba1和hba2)缺失、点突变引起相应珠蛋白链的合成受到不同程度的抑制或功能丧失所致。临床上，常见的α-地中海贫血大多是由于珠蛋白基因的大片段缺失所致，少数为点突变型，其中大片段缺失又以东南亚缺失(--sea)型的发病率最高。当夫妇双方均为--sea基因携带者时，其子代有1/4的概率为hb bart’s胎儿水肿综合征(--sea/--sea)，受累胎儿4个α珠蛋白基因全部缺失，无法进行α珠蛋白肽链的合成。患hb bart’s胎儿水肿综合征的胎儿可能出现水肿、肝脾肿大、胸腹腔积液等，大多数在中晚孕期时胎死宫内或分娩后数小时内死亡，极少数可幸运地存活至出生，但寿命极短；母体则可能发生高血压、先兆子痫、羊水过多以及出血等并发症，给患者及家庭带来了极大的心理负担和经济压力。

2、目前，国内外尚无对重型α-地中海贫血(hb bart’s胎儿水肿本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种用于检测东南亚缺失型α-地中海贫血的引物探针组合物，其特征在于，包括第一引物组、第一探针、第二引物组和第二探针，所述第一引物组包括第一上游引物和第一下游引物，所述第二引物组包括第二上游引物和第二下游引物，所述第一上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述第一下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，所述第一探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，所述第二上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示，所述第二下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示，所述第二探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示，所述第一探针修饰有第一荧光报告基团和第一荧...

【技术特征摘要】

1.一种用于检测东南亚缺失型α-地中海贫血的引物探针组合物，其特征在于，包括第一引物组、第一探针、第二引物组和第二探针，所述第一引物组包括第一上游引物和第一下游引物，所述第二引物组包括第二上游引物和第二下游引物，所述第一上游引物的核苷酸序列如seq id no.1所示，所述第一下游引物的核苷酸序列如seq id no.2所示，所述第一探针的核苷酸序列如seq id no.3所示，所述第二上游引物的核苷酸序列如seq id no.4所示，所述第二下游引物的核苷酸序列如seq id no.5所示，所述第二探针的核苷酸序列如seq id no.6所示，所述第一探针修饰有第一荧光报告基团和第一荧光淬灭基团，所述第二探针修饰有第二荧光报告基团和第二荧光淬灭基团。

2.如权利要求1所述的用于检测东南亚缺失型α-地中海贫血的引物探针组合物，其特征在于，所述第一引物组能特异性结合正常的α珠蛋白基因，所述第一探针能特异性识别所述正常的α珠蛋白基因。

3.如权利要求1所述的用于检测东南亚缺失型α-地中海贫血的引物探针组合物，其特征在于，所述第二引物组能特异性结合东南亚缺失断裂基因序列，所述第二探针能特异性识别所述东南亚缺失断裂基因序列。

4.如权利要求1所述的用于检测东南亚缺失型α-地中海贫血的引物探针组合物，其特征在于，所述第一荧光报告基团选自6-羧基荧光素、亚磷酰胺、(六氯荧光素)活性酯、磺基菁5和马来酰亚胺中的至少一种，所述第一荧光淬灭基团选自小沟结合物、黑洞猝灭剂、磷酸酰胺酯和5-四甲基罗丹明-琥珀酰亚胺酯中的至少一种，所述第二荧光报告基...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄一芳，李琳琳，潘丽秋，凌小婷，龙燕，黄运花，黄思盈，
申请(专利权)人：广西医科大学第一附属医院，
类型：发明
国别省市：