新型CRISPR-Casσ酶和系统技术方案

技术编号:43832477 阅读:29 留言:0更新日期:2024-12-31 18:31
本发明专利技术涉及核酸编辑领域,特别是规律成簇的间隔短回文重复(CRISPR)技术领域。具体而言,本发明专利技术涉及Cas效应蛋白,包含此类蛋白的融合蛋白,以及编码它们的核酸分子。本发明专利技术还涉及用于核酸编辑(例如,基因或基因组编辑)的复合物和组合物,其包含本发明专利技术的蛋白或融合蛋白,或编码它们的核酸分子。本发明专利技术还涉及用于核酸编辑(例如,基因或基因组编辑)的方法,其使用包含本发明专利技术的蛋白或融合蛋白。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及核酸编辑领域,特别是规律成簇的间隔短回文重复(crispr)。具体而言,本专利技术涉及cas效应蛋白,包含此类蛋白的融合蛋白,以及编码它们的核酸分子。本专利技术还涉及用于核酸编辑(例如,基因或基因组编辑)的复合物和组合物,其包含本专利技术的蛋白或融合蛋白,或编码它们的核酸分子。本专利技术还涉及用于核酸编辑(例如,基因或基因组编辑)的方法,其使用包含本专利技术的蛋白或融合蛋白。


技术介绍

1、crispr/cas技术是一种被广泛使用的基因编辑技术,它通过rna引导对基因组上的靶序列进行特异性结合并切割dna产生双链断裂,利用生物非同源末端连接或同源重组进行定点基因编辑。

2、crispr/cas9系统是最常用的ii型crispr系统,它识别3’-ngg的pam基序,对靶标序列进行平末端切割。crispr/cas type v系统是一类近两年新发现的crispr系统,它具有5’-ttn的基序,对靶标序列进行粘性末端切割,例如cpf1,c2c1,casx,casy。然而目前存在的不同的crispr/cas各有不同的优点和缺陷。例如cas本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种蛋白,其具有SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12和13任一项所示的氨基酸序列或其直系同源物(ortholog)、同源物、变体或功能性片段;其中,所述直系同源物、同源物、变体或功能性片段基本保留了其所源自的序列的生物学功能;

2.权利要求1所述的蛋白,其包含选自下列的序列,或由选自下列的序列组成:

3.一种缀合物,其包含权利要求1或2所述的蛋白以及修饰部分;

4.一种融合蛋白,其包含权利要求1或2所述的蛋白以及另外的蛋白或多肽;

5.一种分离的核酸分子,其包含选自下列的序列,或由选自下列的序列组成:...

【技术特征摘要】

1.一种蛋白,其具有seq id no:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12和13任一项所示的氨基酸序列或其直系同源物(ortholog)、同源物、变体或功能性片段;其中,所述直系同源物、同源物、变体或功能性片段基本保留了其所源自的序列的生物学功能;

2.权利要求1所述的蛋白,其包含选自下列的序列,或由选自下列的序列组成:

3.一种缀合物,其包含权利要求1或2所述的蛋白以及修饰部分;

4.一种融合蛋白,其包含权利要求1或2所述的蛋白以及另外的蛋白或多肽;

5.一种分离的核酸分子,其包含选自下列的序列,或由选自下列的序列组成:

6.一种复合物,其包含:

7.权利要求6所述的复合物,其中,所述导向序列连接于所述核酸分子的3’端;

8.一种分离的核酸分子,其包含:

9.一种载体,其包含权利要求8所述的分离的核酸分子。

10.一种宿主细胞,其包含权利要求8所述的分离的核酸分子或权利要求9所述的载体。

11.一种组合物,其包含:

12.一种组合物,其包含一种或多种载体,所述一种或多种载体包含:

13.权利要求11或12所述的组合物,其中,当所述靶序列为dna时,所述靶序列位于原间隔序列临近基序(pam)的3’端,并且所述pam具有5’-ntn所示的序列,其中,n各自独立地选自a、g、t或c;

14.权利要求11-13任一项所述的组合物,其中,所述靶序列是来自原核细胞或真核细胞的dna或rna序列;或者,所述靶序列是非天然存在的dna或rna序列。

15.权利要求11-14任一项所述的组合物,其中,所述靶序列存在于细胞内;或者,所述靶序列存在于体外的核酸分子(例如,质粒)中;

16.权利要求11-15任一项所述的组合物,其中,所述蛋白连接有一个或多个nls序列,或者,所述缀合物或融合蛋白包含一个或多个nls序列;

17.一种试剂盒,其包括一种或多种选自下列的组分:权利要求1或2所述的蛋白、权利要求3所述的缀合物、权利要求4所述的融合蛋白、权利要求5所述的分离的核酸分子、权利要求6或7所述的复合物、权利要求8所述的分离的核酸分子、权利要求9所述的载体、权利要求10所述的宿主细胞、权利要求11-16任一项所述的组合物;

18.一种递送组合物,其包含递送载体,以及选自下列的一种或多种:权利要求1或2所述的蛋白、权利要求3所述的缀合物、权利要求4所述的融合蛋白、权利要求5所述的分离的核酸分子、权利要求6或7所述的复合物、权利要求8所述的分离的核酸分子、权...

【专利技术属性】
技术研发人员:赖锦盛杨志佳余美霞陈建辛蓓蓓滕云鹏周跃恒赵海铭宋伟彬
申请(专利权)人:中国农业大学
类型:发明
国别省市:

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