一种斜纹夜蛾蜕皮激素受体基因EcR的dsRNA制备方法技术

本发明专利技术提供了一种斜纹夜蛾蜕皮激素受体基因EcR的dsRNA制备方法属于害虫防治技术领域。本发明专利技术所述dsRNA由以下步骤制备得到：从斜纹夜蛾幼虫中提取总RNA，将其反转录得到cDNA模板，以该cDNA模板与引物SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：3为基础进行PCR扩增，获得全长序列如SEQ ID NO：1所示，基于此设计引物对，利用所述引物对与SEQ ID NO：1进行PCR扩增，将扩增所得产物进行体外转录得到dsEcR。所述dsEcR注射于斜纹夜蛾幼虫后，其体重显著低于正常生长的斜纹夜蛾，且斜纹夜蛾的总死亡率高达66.7％，对斜纹夜蛾具有显著的灭杀效果。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及斜纹夜蛾防治，尤其涉及一种斜纹夜蛾蜕皮激素受体基因ecr的dsrna制备方法。

技术介绍

1、斜纹夜蛾，别名莲纹夜蛾，是一种杂食性的农业害虫，主要以幼虫为害农作物，其幼虫食性杂、食量大，初孵幼虫在叶背取食叶肉，留下表皮；3龄幼虫后则造成叶片缺刻、残缺不堪甚至全部吃光，严重影响农作物的光合作用和产量。此外，斜纹夜蛾幼虫还蚕食花蕾，造成花蕾缺损，进一步影响农作物的开花结实和品质，对农业生产造成了严重危害，目前与大部分的农业害虫一样，斜纹夜蛾的防治仍是以传统的化学农药为主，化学农药以其使用方法简单，毒性效果好，具一定广谱性等特点而被广泛使用，但在其使用过程中由于连续、频繁使用，抗药性日趋严重，导致生产中病害防效下降、农药残留超标以及食品安全隐患等重大问题。生产上对无公害或低毒农药的需求日益旺盛，研发安全高效且具有新型作用机制的绿色农药是应对上述问题的有效措施。

2、rna干扰(rna interference，rnai)是指外源性双链rna(double-s tranded rna，dsrna)可引起内源或同源基因沉默的现象，在进化过程本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种斜纹夜蛾蜕皮激素受体基因EcR的dsRNA制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的斜纹夜蛾蜕皮激素受体基因EcR的dsRNA制备方法，其特征在于，所述第一引物对基于搜索获得的斜纹夜蛾EcR基因进行设计。

3.根据权利要求1所述的斜纹夜蛾蜕皮激素受体基因EcR的dsRNA制备方法，其特征在于，所述第一引物对包括上游引物SEQ ID NO：2和下游引物SEQ ID NO：3。

4.根据权利要求1所述的斜纹夜蛾蜕皮激素受体基因EcR的dsRNA制备方法，其特征在于，所述斜纹夜蛾幼虫为斜纹夜蛾2龄眠幼虫。>

5.根据权利...

【技术特征摘要】

1.一种斜纹夜蛾蜕皮激素受体基因ecr的dsrna制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的斜纹夜蛾蜕皮激素受体基因ecr的dsrna制备方法，其特征在于，所述第一引物对基于搜索获得的斜纹夜蛾ecr基因进行设计。

3.根据权利要求1所述的斜纹夜蛾蜕皮激素受体基因ecr的dsrna制备方法，其特征在于，所述第一引物对包括上游引物seq id no：2和下游引物seq id no：3。

4.根据权利要求1所述的斜纹夜蛾蜕皮激素受体基因ecr的dsrna制备方法，其特征在于，所述斜纹夜蛾幼虫为斜纹夜蛾2龄眠幼虫。

5.根...

【专利技术属性】
技术研发人员：阚云超，乔惠丽，李丹丹，张东海，仝子乾，石慧轩，刘卓，
申请(专利权)人：南阳师范学院，
类型：发明
国别省市：