一种机械通气致膈肌功能障碍的膈肌卫星细胞模型的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种机械通气致膈肌功能障碍的膈肌卫星细胞模型的制备方法，属于细胞生物学技术领域。包括以下步骤：(1)小鼠经麻醉、机械通气后，沿膈肌外沿剪取膈肌，消化、离心得到膈肌细胞悬液I；(2)将所述细胞悬液I加入MS柱I，离心、重悬得到细胞悬液II，然后与抗integrinα7微珠共孵育，得到预标记的细胞悬液III；(3)取MS柱II在磁性架上进行预平衡；将所述细胞悬液III加入MS柱II，随后将MS柱II从磁场中取出，收集膈肌卫星细胞并培养，得到所述机械通气致膈肌功能障碍的膈肌卫星细胞。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及细胞生物学，特别是涉及一种机械通气致膈肌功能障碍的膈肌卫星细胞模型的制备方法。

技术介绍

1、机械通气(mechanical ventilation,mv)是临床抢救危重症患者的主要手段。常因继发膈肌功能障碍(diaphragm dysfunction,dd)而发生呼吸机致膈肌功能障碍(ventilator-induced diaphragmatic dysfunction,vidd)，最终导致脱机困难。

2、在我国，icu患者中约有73％需接受mv治疗。实施mv 6小时，膈肌收缩力便迅速下降；mv干预18小时即可导致膈肌萎缩；重症患者中约2/3在mv第1天即可出现明显dd，dd患者在icu病死率高达50％。mv常致脱机困难，甚至出现脱机48小时内重新插管，以及心血管疾病、气压伤及呼吸机肺损伤等并发症。在美国，重症患者中约有30％会发生脱机困难，由此产生的治疗成本全年约为640亿美元，占医院总成本的10％。可见，vidd是国际医学界共同面临的难题。

3、目前临床上尚无防治vidd的推荐用药或有效策略，其发病机理及防治机本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种机械通气致膈肌功能障碍的膈肌卫星细胞模型的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在步骤(1)中，所述机械通气的时间为6h。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在步骤(1)中，所述离心的条件为：在4℃，1800rpm离心15min。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在步骤(2)中，所述细胞悬液II的浓度为106个/80μL；所述细胞悬液II与抗integrinα7微珠的体积比为4:1。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在步骤(2)中，所述共孵育的条件...

【技术特征摘要】

1.一种机械通气致膈肌功能障碍的膈肌卫星细胞模型的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在步骤(1)中，所述机械通气的时间为6h。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在步骤(1)中，所述离心的条件为：在4℃，1800rpm离心15min。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在步骤(2)中，所述细胞悬液ii的浓度为106个/80μl；所述细胞悬液ii与抗integrinα7微珠的体积比...

【专利技术属性】
技术研发人员：丁军颖，刘柯，杨春娇，刘清泉，
申请(专利权)人：北京市中医药研究所，
类型：发明
国别省市：