一种溶源性噬菌体群落及其提取方法和应用技术

一种溶源性噬菌体群落及其提取方法和应用，利用切向流技术从原位土壤中等比例分离细菌、噬菌体群落，并通过富集浓缩得到单细菌群落和单噬菌体群落，同时向单细菌群落中添加丝裂霉素C进行溶源诱导，随后再次利用切向流系统过滤富集得到高通量的溶源性噬菌体群落，最终我们获得单细菌群落，细菌‑噬菌体混合群落，细菌与溶源性噬菌体混合群落。噬菌体移植技术能够促进土著微生物参与促进植物生长发育过程，经移植后的溶源噬菌体能够通过优化微生物网络结构、注入辅助代谢基因的方式参与宿主植物激素合成代谢。该方法为我国绿色农业发展提供了长效环保的微生物协同促生技术。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于噬菌体，具体涉及一种溶源性噬菌体群落及其提取方法和应用。

技术介绍

1、在土壤中与根紧密相连的土层，物理、化学和生物学性质上不同于土体的微域环境被称为根际，其中植物通过根分泌沉积物增加根际中分子的多样性和丰富性，进而选择性地招募土壤微生物塑造根际微生物群落结。最近，人们对根际微生物群进行广泛的研究报道，揭示不同植物环境中微生物在结构、组成、动态和功能方面的普遍模式，以及微生物群在促进植物营养和生长中扮演的角色。

2、微生物类群间的跨界互作能够促进噬菌体重塑调控细菌的新陈代谢，细菌噬菌体（简称噬菌体）与宿主细菌是实现跨界互作的典型。噬菌体是一类专属性捕食活体宿主细菌而存活的生物体，在土壤、空气、水中均广泛分布，据估算其总量达到1031数量级。同时噬菌体具备裂解和溶源两种生活方式，其中溶源是指噬菌体将遗传物整合进宿主细菌的基因组中，形成一个叫做"前噬菌体"（prophage）的结构。这种整合使得噬菌体的基因组得以稳定存在于宿主细菌的基因组中，同时前噬菌体的遗传物质可以随着细菌的繁殖一起传递。这样，溶源性噬菌体可以作为一个稳定的遗传载体本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种溶源性噬菌体群落的提取方法，其特征在于，步骤为：将原位土壤与缓冲液混合均匀得到土壤悬液，离心静置后取上清液，利用不同孔径大小的切向流系统分别对细菌和噬菌体群落分离：首先，上清液通过0.2 μm滤膜得到的富集液为细菌悬液，随后向细菌悬液中添加丝裂霉素C至终浓度不超过0.1 μg mL-1，室温下振荡培养，再次利用30-100 kDa的滤膜进行富集，得到溶源性噬菌体群落。

2.根据权利要求1所述溶源性噬菌体群落的提取方法，其特征在于，所述原位土壤与缓冲液的体积比为1:1，缓冲液为pH7.5的Tris - HCl，内含68 mM NaCl和10 mM MgSO4。

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【技术特征摘要】

1.一种溶源性噬菌体群落的提取方法，其特征在于，步骤为：将原位土壤与缓冲液混合均匀得到土壤悬液，离心静置后取上清液，利用不同孔径大小的切向流系统分别对细菌和噬菌体群落分离：首先，上清液通过0.2 μm滤膜得到的富集液为细菌悬液，随后向细菌悬液中添加丝裂霉素c至终浓度不超过0.1 μg ml-1，室温下振荡培养，再次利用30-100 kda的滤膜进行富集，得到溶源性噬菌体群落。

2.根据权利要求1所述溶源性噬菌体群落的提取方法，其特征在于，所述原位土壤与缓冲液的体积比为1:1，缓冲液为ph7.5的tris - hcl，内含68 mm nacl和10 mm mgso4。

【专利技术属性】
技术研发人员：孙明明，吴云玲，张文，吴雅茹，吴世茂，
申请(专利权)人：南京农业大学，
类型：发明
国别省市：