用于检测隐孢子虫的试剂盒及方法技术

本申请涉及用于检测隐孢子虫的试剂盒及方法。本申请提供用于检测隐孢子虫的引物对、crRNA以及试剂盒，基于该引物、crRNA以及试剂盒构建的隐孢子虫的检测方法同样具有高灵敏和高特异性，且反应时间短，单份核酸样本在1小时内可出检测结果，与国标巢氏PCR方法相比可缩短5小时。

【技术实现步骤摘要】

本申请涉及生物，具体涉及用于检测隐孢子虫的试剂盒及方法。

技术介绍

1、隐孢子虫（cryptosporidium）是一种重要的人兽共患肠道原虫，其宿主范围十分广泛，可感染包括人类在内的哺乳动物、鸟类、爬行类、两栖类和鱼类等多种脊椎动物，主要寄生于宿主胃肠道上皮细胞内。目前，31个物种被认为是有效的，较为常见的人兽共患虫种有微小隐孢子虫（c. parvum）和人隐孢子虫（c. hominis）。隐孢子虫多通过受污染的水源和食物等途径传播，由其感染可导致以腹泻为主要临床症状的人兽共患寄生虫病，对人和动物健康造成严重威胁。

2、隐孢子虫的传统检测方法包括粪便涂片镜检法、免疫学方法和核酸检测方法。粪便涂片镜检法存在费时费力、特异性不强的缺点，且误差较大，免疫学技术手段也存在灵敏性不足、操作复杂等缺点。在隐孢子虫的核酸检测方法中，绝大多数都是采用巢氏pcr（nested-pcr）经过两轮扩增后进行跑胶，操作过程相对繁琐，时间约需4-5小时，而且容易污染。

技术实现思路

1、基于此，本申请一实施方式有必要提供本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.用于检测隐孢子虫的引物对，其特征在于，所述引物对包括序列如SEQ ID NO：3~4所示的引物。

2.用于检测隐孢子虫的crRNA，其特征在于，所述crRNA包括序列如SEQ ID NO：5所示的crRNA。

3.用于检测隐孢子虫的反应试剂，其特征在于，所述反应试剂包括RPA扩增反应试剂和CRISPR检测反应试剂；

4.根据权利要求3所述的反应试剂，其特征在于，所述RPA扩增反应试剂还包括RPA反应微球和用于溶解微球的溶解剂中的一种或者多种。

5.根据权利要求3或4所述的反应试剂，其特征在于，所述CRISPR检测反应试剂还包括Cas12...

【技术特征摘要】

1.用于检测隐孢子虫的引物对，其特征在于，所述引物对包括序列如seq id no：3~4所示的引物。

2.用于检测隐孢子虫的crrna，其特征在于，所述crrna包括序列如seq id no：5所示的crrna。

3.用于检测隐孢子虫的反应试剂，其特征在于，所述反应试剂包括rpa扩增反应试剂和crispr检测反应试剂；

4.根据权利要求3所述的反应试剂，其特征在于，所述rpa扩增反应试剂还包括rpa反应微球和用于溶解微球的溶解剂中的一种或者多种。

5.根据权利要求3或4所述的反应试剂，其特征在于，所述crispr检测反应试剂还包括cas12a酶、crispr反应...

【专利技术属性】
技术研发人员：辛本强，李俊强，董瑞玲，陈琛，刘君，卢峰，李东晓，
申请(专利权)人：深圳国际旅行卫生保健中心深圳海关口岸门诊部，
类型：发明
国别省市：