猪繁殖与呼吸综合征抗体检测胶体金试纸条及其制备方法技术

本发明专利技术公开了猪繁殖与呼吸综合征抗体检测胶体金试纸条及其制备方法，属于兽医生物技术领域。本发明专利技术通过优化免疫肽序列并构建重组抗原蛋白表达载体，成功实现了目的蛋白P1NP2的高效表达和纯化。利用Western blot技术验证了重组抗原蛋白与PRRSV抗体的特异结合，证明了其在抗体检测中的可靠性和准确性。通过利用抗原检测胶体金试纸条原理，建立了一种简便、快速且高效的PRRSV抗体检测胶体金试纸条检测方法，并对其性能进行了充分的评估验证。本发明专利技术成功开发出了一种猪繁殖与呼吸综合征抗体检测胶体金试纸条并成功的制备了可以商品化的胶体金试纸条盒子，对PRRSV的诊断和防控具有重要意义。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于兽医生物，涉及猪繁殖与呼吸综合征抗体检测胶体金试纸条及其制备方法。

技术介绍

1、猪繁殖与呼吸综合征（porcine respiratory and reproductive syndrome，prrs）是一种具有传染性的疾病，由猪繁殖与呼吸综合征病毒（porcine respiratory andreproductive syndrome virus，prrsv）感染，可导致所有年龄阶段的猪的呼吸系统疾病和繁殖障碍。由于该病能导致母猪的生产力下降，育肥猪呼吸道症状以及急性死亡从而给猪养殖行业带来巨大的经济损失。

2、由于prrsv的感染具有免疫抑制的特点，能够导致多种病原体侵入机体造成混合感染，并且由于prrsv弱毒疫苗的大规模使用所造成的免疫选择压力使的新型prrsv突变毒株干扰所致的临床症状表现较为复杂，仅从流行病学及临床表现方面很难对prrs做出准确诊断。各种检测prrsv特异性抗体的方法已经投入到生产中。其中常用的血清学诊断方法包括间接免疫荧光抗体测定、免疫过氧化物酶单层测定和酶联免疫吸附测定。elisa是最可靠、最常用本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种猪繁殖与呼吸综合征抗体检测胶体金试纸条，其特征在于，所述胶体金试纸条由金标垫、PVC底板、样品垫、包被膜、吸水纸组成；

2.根据权利要求1所述的猪繁殖与呼吸综合征抗体检测胶体金试纸条，其特征在于，所述重组抗原蛋白P1NP2的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示；编码所述重组抗原蛋白P1NP2的基因序列如SEQ ID NO.1所示。

3.根据权利要求1所述的猪繁殖与呼吸综合征抗体检测胶体金试纸条，其特征在于，所述包被膜采用硝酸纤维素膜。

4.一种猪繁殖与呼吸综合征抗体检测胶体金试纸条的制备方法，其特征在于，将胶体金标记的猪繁殖与呼吸综合征病毒重...

【技术特征摘要】

1.一种猪繁殖与呼吸综合征抗体检测胶体金试纸条，其特征在于，所述胶体金试纸条由金标垫、pvc底板、样品垫、包被膜、吸水纸组成；

2.根据权利要求1所述的猪繁殖与呼吸综合征抗体检测胶体金试纸条，其特征在于，所述重组抗原蛋白p1np2的氨基酸序列如seq id no.2所示；编码所述重组抗原蛋白p1np2的基因序列如seq id no.1所示。

3.根据权利要求1所述的猪繁殖与呼吸综合征抗体检测胶体金试纸条，其特征在于，所述包被膜采用硝酸纤维素膜。

4.一种猪繁殖与呼吸综合征抗体检测胶体金试纸条的制备方法，其特征在于，将胶体金标记的猪繁殖与呼吸综合征病毒重组抗原蛋白p1np2和胶体金标记的羊抗鸡igy抗体按质量比为1:1制得混合液喷于结合垫上制得金标垫；

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述结合垫的制备方法为100mlph7.4 10mmol/l pb缓冲液与0.5g pvp k30、0.2ml tween-20混合，制成结合垫处理液；将聚酯膜6613在混合液中浸泡20min后烘干。

6.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述样品垫的制备方法为将100mlph8.5 0.1mol t...

【专利技术属性】
技术研发人员：张满义，周照斌，南雨辰，梁军，
申请(专利权)人：西北农林科技大学深圳研究院，
类型：发明
国别省市：