一种抗肝癌药物筛选细胞模型及其构建方法和应用技术

技术编号:43594648 阅读:26 留言:0更新日期:2024-12-11 14:45
本发明专利技术公开了一种抗肝癌药物筛选细胞模型及其构建方法和应用。该模型的构建方法包括:1)将EGFP基因融合到Coilin基因的C端,并构建到CMV‑MCS‑EGFP‑PGK‑Puro慢病毒载体上,得到表达Coilin‑EGFP的病毒载体;2)将病毒载体与病毒包装质粒共染到受体细胞中进行病毒包装,将收取的含有病毒的细胞培养液离心,得到含表达Coilin‑EGFP的病毒上清液;3)用含表达Coilin‑EGFP的病毒上清液侵染肝癌细胞系HCCLM3,筛选稳定表达Coilin‑EGFP的细胞株。该应用为所得细胞模型用于筛选抗肝癌药物。本发明专利技术通过选取合适的内切酶,酶切效率高,得到表达Coilin‑EGFP的病毒载体的滴度高,应用于抗肝癌药物筛选,可以直接在荧光显微镜下观察Coilin‑EGFP凝聚体的定位,简单,直观,操作方便,有利于筛选抑制Coilin‑EGFP的细胞核定位的化合物小分子药物。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及肿瘤药物筛选,具体涉及一种抗肝癌药物筛选细胞模型及其构建方法和应用


技术介绍

1、肝癌是一种高发病率和高死亡率的恶性肿瘤,由于缺乏早期症状,大多数肝癌患者确诊时已是晚期。肝癌恶性程度高,发展速度快,转移能力强,治疗后易复发。临床上,单纯的手术治疗、肝动脉结扎插管治疗、介入治疗、局部治疗、放射治疗以及现有的药物治疗等治疗手段均难以取得满意的效果。

2、神经系统正逐渐成为全身健康和恶性细胞微环境的重要调节者。在生命的整个过程中,神经系统主导着器官发育、组织稳态和再生,并对包括免疫系统在内的所有器官系统的生理功能起着核心作用。神经系统由多样的神经元和胶质细胞群体组成,广泛分布于全身,通常与微血管共同形成广泛的神经调控网络,参与肿瘤的发生、进展和转移。更重要的是,肿瘤细胞也能够通过释放神经营养因子和细胞外囊泡来激活周围神经和神经前体细胞,促进肿瘤的神经发生,从而增强肿瘤的侵袭性和转移能力。

3、近年来的一些研究表明,神经系统与肝癌细胞等肿瘤细胞耐药存在密切关联。在临床上,肿瘤治疗难以达到预期效果的一个重要原因是肿瘤微环境中的本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种抗肝癌药物筛选细胞模型的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,所述步骤1)包括以下具体步骤:

3.根据权利要求2所述的构建方法,其特征在于,所述步骤11)中:

4.根据权利要求2所述的构建方法,其特征在于,所述步骤12)包括如下具体步骤:

5.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于:

6.根据权利要求5所述的构建方法,其特征在于,所述步骤2)的具体过程为:

7.一种如权利要求1~6中任一项所述构建方法得到的抗肝癌药物筛选细胞模型。

>8.如权利要求7所...

【技术特征摘要】

1.一种抗肝癌药物筛选细胞模型的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,所述步骤1)包括以下具体步骤:

3.根据权利要求2所述的构建方法,其特征在于,所述步骤11)中:

4.根据权利要求2所述的构建方法,其特征在于,所述步骤12)包括如下具体步骤:

5.根据权利要求1所述...

【专利技术属性】
技术研发人员:王秋雁陆钦晨陶玉婷王富博朱广志
申请(专利权)人:广西医科大学
类型:发明
国别省市:

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