靶向4-1BB和PD-L1的双特异性抗体及其医药用途制造技术

本发明专利技术属于生物医药领域，涉及一种双特异性抗体。具体地，本发明专利技术涉及一种靶向4‑1BB和PD‑L1的双特异性抗体及其医药用途。本发明专利技术的双特异性抗体与4‑1BB蛋白以及与PD‑L1蛋白有较强的亲和力，具有良好的热稳定性，能够显著增强T细胞增殖活性和免疫应答能力，并增强免疫细胞释放IL‑2和IFNγ等免疫细胞因子的能力，有效地抑制肿瘤发生和发展。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物医药领域，涉及一种双特异性抗体。具体地，本专利技术涉及靶向肿瘤坏死因子受体超家族9(tnfrsf9/4-1bb)和程序性死亡蛋白配体-1(pd-l1)的双特异性抗体、编码本专利技术双特异性抗体的多核苷酸、用于表达本专利技术双特异性抗体的载体和宿主细胞、以及本专利技术双特异性抗体在治疗、预防和/或诊断与4-1bb活性和pd-l1活性相关的疾病中的用途。

技术介绍

1、肿瘤免疫治疗是通过人体免疫系统恢复或增强对肿瘤的自然防御的一种治疗方法。这种治疗通常针对癌细胞表面的特定生物分子，如肿瘤相关抗原(taas)。抗肿瘤活性是通过将宿主免疫系统导向taas来实现的，从而建立或诱导针对癌细胞的适应性免疫反应。在过去的几十年里，利用单克隆抗体(mab)治疗癌症取得了巨大的成功，其中许多已经被批准用于癌症治疗或临床试验。

2、免疫检查点(immune checkpoint)是免疫系统中存在的一类抑制性信号分子，通过调节外周组织中免疫反应的持续性和强度避免组织损伤，并参与维持对于自身抗原的耐受。研究发现，肿瘤细胞能够逃避体内免疫系统而失控增殖的本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种双特异性抗体，其包括第一蛋白功能区和第二蛋白功能区，其中：

2.根据权利要求1所述的双特异性抗体，其中，

3.根据权利要求1至2中任一权利要求所述的双特异性抗体，其中，所述第二蛋白功能区为抗PD-L1抗体或其抗原结合片段，或者为抗PD-1抗体或其抗原结合片段。

4.根据权利要求3所述的双特异性抗体，所述抗PD-L1抗体包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含氨基酸序列如SEQ ID NO:31所示的HCDR1、氨基酸序列如SEQ IDNO:32所示的HCDR2和氨基酸序列如SEQ ID NO:33所示的HCDR3，并且所述轻链可变区包含氨...

【技术特征摘要】

1.一种双特异性抗体，其包括第一蛋白功能区和第二蛋白功能区，其中：

2.根据权利要求1所述的双特异性抗体，其中，

3.根据权利要求1至2中任一权利要求所述的双特异性抗体，其中，所述第二蛋白功能区为抗pd-l1抗体或其抗原结合片段，或者为抗pd-1抗体或其抗原结合片段。

4.根据权利要求3所述的双特异性抗体，所述抗pd-l1抗体包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含氨基酸序列如seq id no:31所示的hcdr1、氨基酸序列如seq idno:32所示的hcdr2和氨基酸序列如seq id no:33所示的hcdr3，并且所述轻链可变区包含氨基酸序列如seq id no:34所示的lcdr1、氨基酸序列如seq id no:35所示的lcdr2和氨基酸序列如seq id no:36所示的lcdr3。

5.根据权利要求3至4中任一权利要求所述的双特异性抗体，其中，

6.根据权利要求1至5中任一权利要求所述的双特异性抗体，其中，所述抗4-1bb抗体和/或所述靶向不同于4-1bb的靶点的抗体还独立地包含人重链恒定区和人轻链恒定区，所述人重链恒定区独立地选自人igg1、人igg2、人igg3或人igg4的重链恒定区；

7.根据权利要求1至6中任一权利要求所述的双特异性抗体，其中，所述抗4-1bb抗体和/或所述靶向不同于4-1bb的靶点的抗体还独立地包含人igg1、人igg2、人igg3或人igg4的fc结构域。

8.根据权利要求7所述的双特异性抗体，其中，所述fc结构域的氨基酸序列如seq idno:9至seq id no:17、以及seq id no:67至seq id no:75中的任一序列所示；

9.根据权利要求1至8中任一权利要求所述的双特异性抗体，其中，所述抗原结合片段独立地选自vhh、fab、scfv和sdab。

10.根据权利要求1至9中任一权利要求所述的双特异性抗体，其中，所述第一蛋白功能区和第二蛋白功能区直接连接或者通过连接片段连接；

11.根据权利要求1至10中任一权利要求所述的双特异性抗体，其中，所述其中，所述第一蛋白功能区和第二蛋白功能区独立地为1个、2个或者2个以上。

12.根据权利要求1至11中任一权利要求所述的双特异性抗体，其中，

13.根据权利要求1至12中任一权利要求所述的双特异性抗体，其中，

14.根据权利要求1至13中任一权利要求所述的双特异性抗体，其中，

15.根据权利要求1至14中任一权利要求所述的双特异性抗体，其中，

16.一种分离的多核苷酸，其编码权利要求1至15中任一权利要求所述的双特异性抗体。

17.一种重组表达载体，其包含权利要求16所述的分离的多核苷酸；优选地，所述重组表达载体为重组的真核表达载体。

18.一种重组宿主细胞，其包含权利要求16所述的分离的多核苷酸或者权利要求17所述的重组表达载体；优选地，所述重组宿主细胞是重组的哺乳动物细胞。

19.权利要求1至15中任一权利要求所述的双特异性抗体在制备用于治疗和/或预防与4-1bb和/或pd-l1活性相关的疾病或病症的药物中的用途；优选地，所述疾病或病症为癌症。

20.根据权利要求19所述的用途，其中，所述癌症选自淋巴瘤、骨髓瘤、卵巢癌、乳腺癌、尿路上皮癌、肺癌、肝癌、肾癌、胰腺癌、前列腺癌、结直肠癌、头颈部癌、宫颈癌、膀胱癌、甲状腺癌、子宫内膜癌、黑色素瘤、食管癌和血癌中的一种或多种。

21.一种药物组合物，其包含权利要求1至15中任一权利要求所述的双特异性抗体，以及药学上可接受的载体或赋形剂。

22.根据权利要求21所述的药物组合物，其中所述双特异性抗体的浓度为0.1～100mg/ml，优选为0.2～50mg/ml，更优选为0.5～30mg/ml，更优选为5～25mg/ml，更优选为10～20mg/ml。

23.根据权利要求21至22中任一权利要求所述的药物组合物，其中所述药物组合物的ph为4.5～7.5，优选为4.8～6.0，更优选为5.0～5.5。

24.根据权利要求21至23中任一权利要求所述的药物组合物，其中所述药物组合物的渗透压在250～350mosm/kg的范围内；优选在2...

【专利技术属性】
技术研发人员：周进伟，刘丹丹，周岳华，张静，刘沛想，赵文亭，王静，冯辉，姚盛，
申请(专利权)人：上海君实生物医药科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：